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质粒构建全流程详解与实战指导.pdf

质粒构建全流程详解与实战指导.pdf

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    质粒构建流程

    一、引物设计

    1〕取得目的基因序列,可选用数据库NCBI

    2〕软件分析目的基因可用酶切位点.使用primer5分析出序列不包含的酶切位点,即为可用没

    切位点.

    为备选载体上两个酶切位点的距离应有几十以上选实验室常用酶切位点使用设计目的基因引物目的产物应包含从启动子到终止子全部碱基根据选择的酶切位点查找对应的酶切位点保护碱基将对应片段添加到设计的引物

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