沙门氏菌实验测定方法.docVIP

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  • 2026-07-19 发布于江苏
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沙门氏菌实验测定方法

一、样品前处理

(一)固体样品处理

对于肉类、乳制品、粮食等固体样品,首先进行均质处理。称取25g样品放入无菌均质袋中,加入225mL缓冲蛋白胨水(BPW),使用拍击式均质器以10000-12000r/min的速度均质1-2分钟,确保样品充分分散,形成均质液。若没有均质器,可将样品剪碎后置于无菌研钵中,加入少量BPW研磨成糊状,再转移至三角瓶中,补充剩余BPW并充分摇匀。

(二)液体样品处理

液体样品如牛奶、饮用水等,直接量取25mL加入225mLBPW中,轻轻摇匀即可。若样品含有防腐剂,需适当增加BPW的用量,或者使用含有中和剂的缓冲液,以消除防腐剂对沙门氏菌的抑制作用。

(三)表面样品处理

对于物体表面的采样,可使用无菌棉拭子蘸取BPW,在表面按一定规格擦拭,然后将棉拭子放入含有10mLBPW的试管中,充分振荡洗脱,使样品中的沙门氏菌进入液体中。

二、增菌培养

(一)预增菌

将处理好的样品均质液置于36℃±1℃的培养箱中培养8-18小时。预增菌的目的是使受损伤的沙门氏菌恢复活性,同时让沙门氏菌在适宜的环境中初步繁殖,提高后续检测的阳性率。在培养过程中,需定期观察培养物的变化,若出现明显的浑浊、沉淀或颜色改变,说明有细菌生长。

(二)选择性增菌

预增菌后,分别取1mL培养物接种于10mL四硫磺酸盐煌绿(TTB)增菌液和亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液中。TT

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