QIAamp-Viral-RNA-Mini-Kit中文说明书优质文档.docVIP

大致流程：

QIAampViralRNAMiniKit利用了硅胶膜的选择吸附的特性，结合真空或分离柱处理，是同时纯化多个样品的理想选择。先将样品在高变性条件下裂解，灭活RNase，确保病毒RNA的完整性。调节buffer至QIAamp膜吸附RNA的最佳条件，将样品转入QIAampMinicolumn。RNA与膜结合，而其他污染物则用两种不同的洗液分两步除去。用特殊的Rnase-free缓冲液洗脱得到的高质量的RNA，可以直接进行下游实验，也可储存备用。纯化产物无蛋白质，核酸，其他杂质和抑制剂污染。无需酚/氯仿抽提或酒精沉淀，QIAamp膜就可以保证高纯，完整的RNA的极高回收率。所有缓冲液和试剂都保证是无Rnase污染的。

注意：

样品如果是冷冻保存的，要避免反复冻融。否则会导致蛋白质变性沉淀，降低病毒效价，最终减少产量。此外，沉淀还会堵塞QIAamp膜。若产生了沉淀，可以通过6800×g，离心3min，小心吸取上清进行实验。

在将样品放入QIAamp分离柱前，一定要将裂解液的条件调至病毒RNA的最佳吸附条件。如果起始样品量较大，超过了140ul，那么最好分几次放入分离柱。

如果样品中存在细胞DNA，那么纯化过程中DNA会与病毒RNA一起提取出来。为避免此现象的发生，推荐用无细胞液体提取病毒RNA。如果样品中含有细胞，如脑脊液，骨髓，尿液等，应该先过滤，或者1500×