基于分子尺技术的RNA三维动态解析在功能不明变异解读中的应用进展.pdfVIP

基于分子尺技术的RNA三维动态解析在功能不明变

异解读中的应用进展

【摘要】遗传变异的功能性诠释是精准医学的核心议题。大量“意义未明变异(V

US)”因缺乏改变蛋白质序列的直接证据而难以确权,但可能通过重塑RNA分子

的构象系综与能量景观而导致疾病,这一机制超出了线性转录组学的探测维度。

本文系统阐述了一种基于非天然碱基对介导的分子尺技术。该方法通过位点特异

性标记,结合脉冲电子双共振、单分子荧光共振能量转移和X射线散射干涉等技

术,能够在埃至纳米级的空间尺度与纳秒至秒级的时间尺度上精准测定RNA的构

象系综与动力学变化。本文论证了遗传变异如何通过改变RNA的能量景观、诱导

动力学陷阱或影响翻译速率等物理机制导致功能失调,并探讨了将结构动力学数

据转化为美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)和分子病理协会(AMP)相关指南

中的PS3/BS3级功能证据所面临的挑战。最后,本文提出了一种整合人工智能预

测、高通量活细胞化学探针测定、贝叶斯统计评估与分子尺技术验证的分级筛查

策略,这一结构动力学分析范式有望为VUS的精准解读提供物理学依据,进而作

为新型功能证据支持现有指南的致病性评级,并为靶向RNA药物的开发提供参考。

【关键词】意义未明变异;RNA构象动力学;分子尺;非天然碱基对;功能诠