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组织切片操作流程规定

一、概述

组织切片操作是生物医学研究和临床病理诊断中的关键环节。为确保操作规范、结果准确、安全高效，特制定本流程规定。本规定适用于组织样本的固定、脱水、包埋、切片、染色及封片等全过程，旨在统一操作标准，降低人为误差，保障实验质量。

二、操作准备

（一）仪器与设备

1.恒温箱（温度范围：37℃±1℃）

2.脱水机（支持乙醇梯度脱水）

3.石蜡包埋机（温度范围：60℃±2℃）

4.切片机（精度≥20μm）

5.染色架与摇床

6.脱水剂（乙醇、二甲苯等）

7.固定液（10%中性缓冲甲醛）

8.包埋剂（石蜡）

9.染料（苏木精、伊红等）

（二）试剂与耗材

1.固定液：需新鲜配制，pH值调至7.2-7.4。

2.脱水液：乙醇浓度梯度为70%、80%、90%、95%、100%。

3.清洗液：无水乙醇与二甲苯混合（体积比1:1）。

4.封片剂：中性树胶或DPX。

（三）样本要求

1.样本尺寸：厚度≤5mm，面积≥1cm2。

2.采集后立即固定，固定时间不少于24小时。

3.样本编号需与病历或实验记录一致，避免混淆。

三、操作步骤

（一）样本固定

1.采集组织后，立即置于10%中性缓冲甲醛中。

2.确保样本完全浸没，无气泡。

3.放置于4℃冰箱固定24-48小时。

（二）脱水与透明

1.固定后取出样本，依次浸泡于：

(1)70%乙醇（