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基因工程复习题

一、基因工程基础知识与工具酶

1.简述基因工程的定义及其核心技术环节。

*参考答案要点：基因工程指按照人们的设计蓝图，将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序。核心技术环节应包括：目的基因的获取、基因载体的选择与构建、目的基因与载体的拼接、重组DNA分子导入受体细胞、重组体的筛选与鉴定、目的基因的表达与产物的分离纯化。

2.什么是限制性内切核酸酶？简述其分类及在基因工程中最常用的类型及其主要特点。

*参考答案要点：限制性内切核酸酶是一类能够识别双链DNA分子中特定核苷酸序列，并在特定位置切割磷酸二酯键的核酸水解酶。可分为I、II、III、IV型。基因工程中最常用的是II型限制性内切核酸酶。其主要特点为：能识别双链DNA的特异序列，并在该序列内或附近特异性切割；识别序列通常具有回文结构；切割后可产生粘性末端（5或3突出）或平末端。

3.比较DNA连接酶和DNA聚合酶在功能上的主要异同点。

*参考答案要点：相同点：两者都能催化形成磷酸二酯键。不同点：DNA连接酶连接的是双链DNA分子中两个相邻的3-羟基和5-磷酸基团，不需要模板，主要用于DNA片段之间的连接；DNA聚合酶则是以单链DNA为模板，将脱氧核苷酸逐个添加到引物或延