吲哚乙酸氧化酶活性的测定精品课件.pptVIP

吲哚乙酸氧化酶活力的测定P144

熟悉运用比色法测定吲哚乙酸氧化酶活力的方法，并掌握测定酶活力的基本要求。实验目的

实验原理吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破坏失去活力。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小，对调节体内吲哚乙酸的水平起着重要的作用，从而影响植物的生长。酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。IAA+FeCl3→红色螯合物

绿豆芽的下胚轴。实验材料上胚轴:子叶到第1片真叶之间的部分下胚轴:子叶与根之间的一部分下胚轴取材部位

②处理：在试管中加入：MnCl21ml+2，4-二氯酚1ml+IAA2ml+酶液1ml+磷酸缓冲液5ml对照：在试管中加入：MnCl21ml+2,4-二氯酚1ml+IAA2ml+磷酸缓冲液6ml①称取1g下胚轴，置于研钵中，加入预冷的磷酸缓冲液(pH=6.1)1ml，研磨成匀浆，再用9ml分2次冲洗，总体积为10ml。离心4000rpm10min，所得的上清夜即为粗酶液。IAA含量的测定方法步骤标准曲线的绘制。IAA氧化酶需要两个辅助因子：一元酚和二价离子Mn

计算时间(h)IAA氧化酶活力=(μg·IAA/h·ml)对照—处理(μg/ml)×10保温：30℃温箱中30min；