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B3Z系统的抗原交叉呈递实验

一、引言

抗原呈递是适应性免疫应答的核心环节，其中，抗原交叉呈递特指抗原提呈细胞（APC）摄取、加工外源性抗原，并通过MHCI类分子途径将抗原肽呈递给CD8+T细胞的过程。这一过程在抗病毒免疫、肿瘤免疫以及自身免疫调节中均扮演着至关重要的角色。为深入探究抗原交叉呈递的分子机制、筛选具有交叉呈递潜能的抗原或评估特定药物对该过程的影响，建立一个简便、高效且特异性强的实验模型至关重要。B3ZT细胞杂交瘤系统便是这样一种被广泛应用的经典工具。本实验旨在详细介绍如何利用B3Z细胞系来检测和量化抗原交叉呈递效率。

二、实验原理

B3Z细胞是一种经过基因工程改造的T细胞杂交瘤，其T细胞受体（TCR）能够特异性识别小鼠MHCI类分子（H-2Kb）提呈的卵清蛋白（OVA）来源的8肽（SIINFEKL）。更为关键的是，B3Z细胞的激活下游信号通路与β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）报告基因的表达相关联。当B3Z细胞的TCR识别到APC表面H-2Kb/SIINFEKL复合物后，会发生激活，进而表达β-半乳糖苷酶。通过检测β-半乳糖苷酶的活性，即可间接反映APC对抗原的交叉呈递能力。

具体而言，实验流程包括：外源性OVA抗原（或表达OVA的细胞）被APC（如树突状细胞、巨噬细胞或B细胞）摄取；抗原在APC内经历加工处理，其中一部分外源性OVA抗原会通过交