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2026/06/27细胞传代操作注意事项图示汇报人：实验室培训部

目录细胞传代前的准备工作细胞传代核心操作步骤细胞传代后的质量控制常见问题及处理预案核心要点总结0102030405

细胞传代前的准备工作01

器材准备培养容器选择快速贴壁细胞（如HEK293）→60mm培养皿慢贴壁细胞（如原代细胞）→100mm培养瓶特殊实验需求→U型培养皿等特殊形状容器培养基配制基础培养基DMEM/F12添加成分10%FBS+1%双抗灭菌条件121℃高压灭菌，持续15分钟特殊细胞系需添加特定生长因子其他器材准备移液器根据细胞密度选择（建议1000μl处理60mm培养皿）吸头无热原处理的聚丙烯材质，避免交叉污染细胞计数板用于细胞计数和活力评估

环境准备操作前开启至少开启30分钟，使工作台内空气达到平衡台面清洁保持工作台面清洁，避免食物残渣和水分手部消毒75%酒精擦拭双手后再进行细胞操作温湿度控制37℃温度控制±0.5℃50-60%湿度控制培养箱环境温度波动影响温度波动直接影响细胞代谢速率湿度不足风险湿度不足会导致培养基过快蒸发CO?环境需求大多数哺乳动物细胞培养需要5%CO?环境定期校准定期校准CO?传感器，避免浓度偏差浓度异常影响过高或过低的CO?浓度都会影响细胞pH值，导致生长异常

细胞传代核心操作步骤02

细胞消化细胞消化时间对比消化完成标志：细胞变圆过短：细胞未充分脱离过长：损