血红蛋白的分离和提取.ppt

血红蛋白的分离和提取;一、基础知识：

（一）蛋白质分离原理

（二）蛋白质分离的方法

1）凝胶色谱法：又称分配色谱法

2）电泳法

（三）缓冲液的作用;二、实验操作－－实验步骤;;1.凝胶色谱法;3、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，（）的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程（），移动速度（），而（）的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在（）移动，路程（），移动速度（），相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。;

洗脱：

从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

;2．凝胶电泳法：;3）常用电泳方法

琼脂糖凝胶电泳

聚丙酰胺凝胶电泳

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

在测定蛋白质分子量时通常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，使用时可选用一组已知分子量的标准蛋白同时进行电泳做对照，根据两者的电泳区带位置，利用相关计算公式算出相对分子量

SDS带负电荷多的，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷的差别，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。;影响蛋白质分子运动速度的因