基因工程2ppt课件精选全文完整版.pptVIP

.⑤电场方向。电场方向改变,DNA分子被迫改变路径,DNA分子越大,为适应新的电场方向而重新排列所需的时间就越长。因此可以通过脉冲电场凝胶电泳来分辨极大的DNA分子。.3.2核酸的分子杂交技术3.2.1探针标记带有能检测的标记物的DNA或RNA叫探针。使DNA或RNA带有可检测的标记物的过程叫探针标记。①切口平移标记控制DNaseI的浓度，就可以在双链DNA分子的一条链的有限位置上打开切口，形成3-OH末端（这条链即成为引物)。DNA聚合酶I把一个带有标记物的dNTP就加在这引物的3-OH末端，而它的5-3的核酸外切酶活性将切除5-单核苷酸，同时依次添加新的核苷酸到3一侧，其结果使切口沿着DNA平移，这就叫切口平移（Nicktranslation)..②随机引物标记能与任何DNA配对互补的一小段DNA序列叫随机引物。DNA聚合酶klenow大片段能在随机引物的引导下以带有标记物的dNTP为原料合成新的与模板DNA互补的探针。.3.2.2核酸的分子杂交①SouthernblotSouthern杂交技术由E.Southern于1975年发明，它现在是基因分离和鉴定中不可缺少的一个重要手段。待分析的基因组DNA或其它DNA首先用一种或几种限制性核酸内切酶消化，消化后的DNA片