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生物技术生物科研所科研助理实习报告

一、摘要

2023年7月1日至2023年8月31日，我在生物技术生物科研所担任科研助理实习生。通过参与基因编辑实验，完成对100个样本的CRISPRCas9筛选，成功鉴定出23个目标基因突变体，突变效率达23%，高于实验室历史平均数。运用分子克隆技术构建了5种重组表达载体，并使用qPCR验证了其中3种的转录活性，扩增效率在95%98%之间。掌握了高速离心（12,000rpm,30分钟）、琼脂糖凝胶电泳（100V,30分钟）等核心实验操作，系统应用了实验记录与数据分析方法，形成标准化操作流程文档，可复用于后续类似实验。

二、实习内容及过程

2023年7月1日至8月31日，我在生物技术生物科研所做科研助理。单位主要搞基因功能研究，有合成生物学和分子遗传学两个小组，我跟着做基因编辑方向的老师。

我的实习目的就是摸清基因敲除的整个流程，顺便学点实际操作。当时有个项目要筛选抗除草剂性状的突变体，我参与其中。7月10号开始做细胞培养，用了293T细胞系，每天得传三次，每次处理10个培养皿。8月5号转染CRISPRCas9试剂，用了100nM浓度，转了200个样本，分装在96孔板里。转染后第72小时开始观察细胞形态，挑出绿色荧光的克隆，大概选了80个。

8月15号开始做测序验证，送检了50个样本，拿到结果后比对参考基因，发现23个有突变，集中在靶基因的e