犬细小病毒实时荧光定量 PCR 检测方法.pdfVIP

GB/TXXXXX—XXXX

附录A

（规范性）

犬细小病毒实时荧光定量PCR检测方法

A.1主要设备和材料

A.1.1荧光定量PCR仪

A.1.2高速冷冻离心机

A.1.3台式离心机

A.1.4恒温孵育器/恒温水浴槽

A.1.5漩涡振荡器

A.1.6研磨仪

A.1.7-80°C冰箱，-20°C冰箱，2~8°C冰箱。

A.1.8微量移液器(10μL，200μL，1000μL，)。

A.1.9无DNase的离心管(1.5mL、2mL、5mL、15mL),无DNase的吸头(10μL，200μL，1000

μL)，无DNase的PCR扩增反应管。

A.2试剂

A.2.1商品化DNA抽提试剂盒或等效试剂。

A.2.2荧光定量PCR试剂盒或等效试剂盒。

A.2.3引物和探针：根据表1的序列合成引物和探针，引物和探针加无DNase水分别配制成100

μmol/L储备液，使用前将储备液配置成10μmol/L工作液，-20°C保存。

A.3样本的采集

A.3.1脏器组