弓形虫普通 PCR 和实时荧光定量 PCR 方法.pdfVIP

GB/TXXXXX—XXXX

附录A

（规范性）

弓形虫间接血凝法检测方法

A.1材料和试剂

按照6.3-6.6进行材料和试剂的准备。

A.2样品的采集

A.2.1采血约1mL（小鼠、大鼠、地鼠眶静脉窦采血；豚鼠心脏采血；兔耳部采血；犬和猴后肢

静脉采血），凝血试管斜放待凝，置4℃冰箱2h。

A.2.22h后，从冰箱中取出凝血试管，轻轻吸取血清移入另一试管中。

A.2.3将分离出的血清置56℃水浴中灭活30min，备用。

A.3加样

在微量反应板上，依次对每份血清进行倍比稀释，每份血清稀释两横排，每孔留量为25μL。同

时设阳性对照、阴性对照和空白对照。

A.4加致敏红细胞

第一横排滴加弓形虫致敏红细胞25μL，第二横排滴加正常对照绵羊红细胞25μL。将加好样品

的微量反应板置于震荡器上震荡3min～5min，使致