《仪器分析》第三章 高效液相色谱分析法 HPLC.pptxVIP

《仪器分析》

第三章

高效液相色谱分析法HPLC;高效液相色谱法：

特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学

键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实

验技术建立的一种液相色谱分析法。

高压：150-350*105Pa

高效：大于30000塔板/米

高灵敏：10-9g（紫外检测）、10-11g（荧光检测）;一、HPLC与GC差别;2．流动相差别的区别

GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用

力，只与固定相有相互作用。

HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用

力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起

正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改

变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当

选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相

也可以增大分离选择性。

3．操作条件差别

GC：加温操作

HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）

;;三、HPLC的特点和实际应用;§2-2基本理论和条件选择;1.;2）涡流扩散项及其影响;3）传质阻抗项及其影响;1．;1.固定相与装柱方法的选择：

选粒径小的、分布均匀的球形固定相

（dp≤10μm）

首选化学键合相，匀浆法装柱

2.流动相及