（共11页PPT）第7讲第二章第二节基因工程的克隆载体.pptVIP

湖南师范大学生命科学学院第7讲噬菌体载体基因工程第二章基因工程工具酶和载体湖南师范大学生命科学学院袁婺洲本章目录2.1工具酶2.2克隆载体2.3表达载体质粒噬菌体柯斯质粒人工微小染色体第二节克隆载体5’TCCAGCGGCGGGG3’3’CCCGCCGCTGGA5’-DNA48.5kb非必需片段18kb溶菌控制基因晚期控制基因DNA合成控制基因阻遏基因早期控制基因重组基因阻遏基因删除与整合基因尾部合成基因Cos位点COS序列12bpCOS位点头部合成基因约20kb二、λ噬菌体载体约12kbλ-DNA载体的构建删除一些多余的酶切位点野生型的l-DNA链上有5个EcoRI位点和7个HindIII位点，不利于重组操作，必须删除，保留一个。?增加一些单一的酶切位点。增加标记基因lacZλ噬菌体插入型与置换型载体COSCOS左臂右臂LacZMCSλgt系列＜10kb20-25kb利用λ噬菌体载体构建基优点：感染效率高装载容量增大体外包装三、M13单链噬菌体由外壳包装蛋白和正链DNA组