HCP抗血清表征与二维电泳检测技术.pdfVIP

HCP抗表征及二维凝胶电泳检测HCPs

Anja

Dommermuth,

Fabian

Milz,

Anna

Lendzian,

Thomas

Flad,

Andreas

Wattenberg

Protagen

Protein

Services

GmbH,

德国多特蒙德市

引言

在哺乳动物细胞中开发和生产重组生物药物需要HCPs（宿主细白）这类杂质。免疫分析法仍是放行检测的首选方法，建议在质量管理规范（QM）环

境中验证抗的适用性以满足要求。其中最关键的是证明抗对作为抗原的HCPs的覆盖度及表征。我们提出采用二维差异凝胶电泳（2D‑DIGE）、二维

凝胶和印迹技术定性检测HCPs、表征抗及比较不同HCP批次的方法。这些方法需通过优化的分析流程实施，才能为覆盖度分析所需灵敏度。为确保最佳

检测效率，我们建立了优于商业化IPG胶条系统的高分辨率二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D‑PAGE）及印迹体系。此外，提高覆