菌株分离鉴定、药敏实验及PCR扩增实验过程.docVIP

目录

TOC\o1-3\h\z\u2.1菌株的分离纯化 1

2.1.1菌株的分离 1

2.1.2菌株的纯化 1

2.2菌株的鉴定 2

2.2.1革兰氏染色镜检 2

2.2.2菌株的生化鉴定 2

2.3药敏试验 3

2.3.1药物的配制 3

2.3.2质控 4

2.3.3MIC(最小抑菌浓度)实验 4

2.4CTX-M型基因的PCR扩增模板的提取 7

2.5CTX-M型基因的PCR扩增 7

2.5.1PCR扩增引物及条件 7

2.5.2电泳检测PCR扩增产物 8

2.1菌株的分离纯化

2.1.1菌株的分离

2.1.1.1实验的准备

1.分离管的准备:本实验需要100个50ml离心管

(1)用过的离心管,将盖子拧开,加入清洁剂,沸水浴10min,毛刷清洁;

(2)没入加入清洁剂的水中,灌满水,不要留有大气泡;

(3)放入超声清洁机中超声清洁45min,25℃,100Hz;

(4)倒出管中水,灌满去离子水,再超声20min,25℃,100Hz;

(5)倒出管中水,重复(4)一次;

(6）倒出管中水,放入60℃烘箱中烘干;

（7)待烘干后装入保鲜袋中,扎孔通气,再用报纸或牛皮纸包好,放入高压锅中高压灭菌,121℃