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离子交换层析分离操作规程

离子交换层析分离操作规程

1.原理与准备

离子交换层析是一种基于待分离物质与固定相(离子交换剂)之间可逆的离子交换作用,依据各组分电荷性质、数量及分布差异进行分离的液相层析技术。其核心在于选择合适的离子交换剂、缓冲体系及洗脱条件,以实现目标分子的高效吸附、杂质去除及特异性洗脱。操作前,需进行全面的准备工作。

首先,根据目标分子的等电点(pI)、稳定性及实验目的,选择适宜的离子交换剂类型。对于带正电荷的碱性分子(如碱性蛋白、多肽),应选用阳离子交换剂(如羧甲基CM-、磺酸基SP-);对于带负电荷的酸性分子(如酸性蛋白、核酸),则选用阴离子交换剂(如二乙氨基乙基DEAE

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