（共16页PPT）第6讲第二章第二节基因工程的克隆载体.pptVIP

湖南师范大学生命科学学院第6讲质粒载体基因工程第二章基因工程工具酶和载体湖南师范大学生命科学学院袁婺洲本章目录2.1工具酶2.2克隆载体2.3表达载体质粒噬菌体柯斯质粒人工微小染色体第二节克隆载体克隆载体应具备的条件具有针对受体细胞的可转移性具有独立自主的复制原点或整合位点具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点具有合适的筛选标记具有较高的拷贝数具有较高的外源DNA的装载能力一、质粒细菌染色体外的遗传因子，闭合环状双链DNA大小：1-200kb能自主复制，但要利用寄主细胞复制染色体的同一组酶系复制分松弛型和严谨型两种松弛型：10-200拷贝严谨型：1-10拷贝有某些基因，如抗药性基因，对寄主的生长是有利的可转移性：接合生殖或转化酶切位点：改建20141、质粒载体的标记基因1)氨苄青霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素和新霉素抗性基因2）lacZ基因或lacZ’基因诱导物：乳糖底物：乳糖LacZ标记基因LacZ基因表达的蓝白斑菌落空转化子：蓝色重组子：白色受体细胞有无lacZ基因？pU