M13基因组的复制型非常像质粒.pptVIP

4.M13和质粒的杂交载体－噬菌体质粒M13可以产生单链DNA，这使得它非常有用，但它有一个很大的缺点。当用M13作载体时，它可以容纳DNA片段的大小十分有限。为了解决这一问题，人们把M13基因组的一部分和质粒DNA结合在一起，构成一种新型的载体，叫做噬菌体质粒（phagemids)。pEMBL8载体它是通过把M13基因组中一个1300bp的片段导入pUC8中而构建的。M13在形成被分泌的噬菌体颗粒前有一种酶使双链DNA变成单链DNA,而被导入的那一段M13DNA则含有这种酶识别的信号序列。尽管这段序列已经从M13噬菌体基因组中被分离出来,但它的功能还在。所以,pEMBL8也可以转化为单链DNA。用作pEMBL8克隆实验的宿主大肠杆菌细胞必须随后被正常的M13噬菌体感染,而在这里正常的M13噬菌体作为辅助噬菌体,提供必要的复制酶和蛋白质外壳。pEMBL8是从pUC8发展来的,同样也有插入多接头的lacZ’基因,重组体可以通过在含有X-gal培养基上的噬菌斑而被鉴定出来。我们可以用pEMBL8产生达到10Kb的单链DNA片段,这极大地扩展了M13克隆系统的使用范围。1.具有较小分子量的共价、闭合、环形的基因组DNA，可克隆10kb的外源DNA片段，并易于进行分离与操作;2.编码一个ampr基因作为选择