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ctDNA动态监测服务规范

一、技术要求与标准

1.1检测技术选择与性能标准

ctDNA动态监测需根据临床需求选择适宜的技术平台，目前主流方法包括数字PCR（dPCR）和下一代测序（NGS）。数字PCR技术适用于已知突变位点的精准定量，其最低检测限（LOD）应达到0.1%变异等位基因频率（VAF），且在95%置信区间内的变异检出率不低于98%。下一代测序技术则需采用杂交捕获或扩增子测序策略，覆盖至少500个肿瘤相关基因，测序深度应达到10,000×以上以确保低频突变检出，平均测序均一性（Q30比例）需≥90%，碱基错误率≤0.001%。甲基化检测作为新兴技术，应采用亚硫酸氢盐转化结合靶向测序方法，CpG位点覆盖度需≥95%，甲基化水平定量准确度误差应控制在±5%以内。

1.2样本采集与处理规范

血液样本采集需使用含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管，采集volume为10-15mL，采集后2小时内4℃离心（1600×g，10分钟）分离血浆，再次离心（16000×g，10分钟）去除残留细胞。血浆样本应在-80℃保存，避免反复冻融（≤3次），运输需使用干冰维持-70℃以下环境。对于无法立即处理的样本，可添加细胞稳定剂（如Streck管），但保存时间不应超过72小时。样本处理区域需严格划分预处理区、核酸提取区和扩增区，各区使用独立的仪器设备与耗材，防止交叉污染。

1.3核酸提取与