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ctDNA定量分析服务规范

一、技术原理与核心价值

循环肿瘤DNA（ctDNA）是肿瘤细胞凋亡、坏死或主动分泌释放至外周血的片段化DNA，长度约132-145bp，半衰期通常小于2小时。其携带的肿瘤特异性基因突变（如EGFR、KRAS、BRAF等）和表观遗传修饰（如甲基化）可作为实时反映肿瘤负荷的分子标志物。ctDNA定量分析通过检测血液中这些特异性片段的浓度（通常以拷贝数/mL或变异等位基因频率VAF表示），实现对肿瘤动态变化的无创监测。

ctDNA检测的核心技术基础包括：

分子识别原理：通过肿瘤组织突变谱确定个性化标志物（tumor-informed策略），或采用泛癌种Panel检测常见驱动基因（tumor-na?ve策略），结合分子标签（UMI）技术实现单分子级追踪。

高灵敏度检测：利用高通量测序（NGS）平台，结合探针捕获或扩增子技术，实现低至0.01%VAF的检测灵敏度，满足早期微小残留病灶（MRD）监测需求。

定量校准体系：通过已知浓度的标准品（如SeraCarexGEN?referencematerial）构建标准曲线，确保VAF计算的准确性，变异系数（CV）需控制在15%以内。

二、标准操作流程

2.1样本采集与预处理

血液采集规范：

使用含EDTA-K2或StreckCell-FreeDNABCT?的真空管，采集10-15mL外周血，轻柔颠倒8-10