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DNA甲基化的测定焦磷酸测序法

DeterminationofDNAmethylation—Pyrosequencing

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1范围

本标准规定了用焦磷酸测序法测定DNA甲基化的方法。

本标准适用于动植物组织或体外培养细胞DNA甲基化测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

相关标准分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义、缩略语

3.1术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1.1

DNA甲基化DNA犿犲狋犺狔犾犪狋犻狅狀

在DNA甲基转移酶的催化下，以S腺苷甲硫氨酸为甲基供体，将甲基转移至碱基特定结构上的过程。

3.2缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA：脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

PCR：聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)

4原理

DNA经重硫酸盐硫化处理后，DNA双链中未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，通过PCR将尿嘧啶转化为胸腺嘧啶，根据PCR产物中相应甲基化位点的胞嘧啶和胸腺嘧啶的比例进行定量。

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