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WB（蛋白免疫印迹）实验试题及详细参考答案

适用课程：分子生物学实验、生物化学实验、基础医学实验

考试时长：60分钟

满分：100分

一、单项选择题（每题3分，共30分）

1.WB实验中SDS凝胶电泳的主要作用是（）

A.纯化蛋白B.按分子量分离蛋白C.蛋白抗原修复D.蛋白定量

2.SDS在电泳缓冲液中的核心作用是（）

A.增加溶液导电性B.使蛋白变性并带均一负电C.维持pH稳定D.防止蛋白降解

3.以下哪种试剂常用于抑制样本中的蛋白酶，防止蛋白降解（）

A.PMSFB.TEMEDC.APSD.DTT

4.WB转膜过程中，最常用的膜材料是（）

A.滤纸膜B.NC膜/PVDF膜C.微孔滤膜D.透析膜

5.PVDF膜使用前必须进行的操作是（）

A.清水浸泡B.甲醇活化C.缓冲液预热D.高温灭菌

6.封闭步骤的主要目的是（）

A.增强蛋白结合力B.封闭膜上空白位点，降低非特异性杂带C.促进抗原抗体结合D.固定蛋白

7.抗体孵育过程中，4℃过夜孵育的主要优势是（）

A.缩短实验时间B.提高抗原抗体结合特异性与结合效率C.避免抗体失活D.防止膜干燥

8.WB显影出现高背景、整片膜发黑，最不可能的原因是（）