鞭虫小鼠模型经口感染虫卵培养滤纸法更换湿润滤纸防干燥安全操作规范.docVIP

鞭虫小鼠模型经口感染虫卵培养滤纸法更换湿润滤纸防干燥安全操作规范

一、操作前准备

（一）环境与设备准备

实验环境确认实验需在具备生物安全二级（BSL-2）资质的实验室中进行，操作前需检查实验室的通风系统是否正常运行，确保空气流通良好，避免虫卵气溶胶在实验室内扩散。同时，确认实验台已用75%酒精擦拭消毒，台面无杂物，操作区域整洁有序。实验过程中需开启生物安全柜，提前30分钟运行生物安全柜的风机，使柜内形成稳定的气流环境，保证操作过程在负压环境下进行，防止虫卵外泄。

设备校准与检查使用精密电子天平称量滤纸和虫卵时，需提前对天平进行校准，确保称量结果准确无误。检查移液器的准确性，可通过吸取定量的蒸馏水进行称重验证，保证移液器能够精准吸取所需体积的液体。此外，需确认恒温培养箱的温度和湿度设置正确，提前将培养箱温度调整至37℃，湿度设置为70%-80%，并使用温湿度计进行实际测量，确保培养箱内环境符合虫卵培养的要求。

（二）材料与试剂准备

滤纸选择与处理选用直径为90mm的定性滤纸，滤纸需具备良好的吸水性和透气性，且无破损、无杂质。使用前，将滤纸放入高压灭菌锅中，在121℃、0.1MPa的条件下灭菌20分钟，以杀灭滤纸上可能存在的微生物。灭菌后的滤纸需放入无菌干燥箱中烘干，或在超净工作台内自然晾干，避免滤纸受潮。

试剂配制与保存配制0.85%的生理盐水，称取8.5g氯化钠溶解于1000m