前期处理CSF、BALF、胸腹水等:过滤、离心后制成单细胞悬液,并调整目标细胞浓度约106/ml骨髓、红细胞:调整样本中目标细胞浓度106/ml50~100?l标本(血小板1~5?l)+荧光抗体室温,避光,抗体孵育20min(胞内因子检测需置4℃)抗体孵育如果需要破坏样本中红细胞:加入1ml红细胞裂解液避光,10min溶血离心弃上清,加入PBS,混匀后离心,弃去上清用400?lPBS充悬,避光待上机。胞内抗原检测:按照说明书加入固定剂、破膜剂及胞内荧光抗体,避光反应30~40min。胞内染色洗涤上机已开展
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