琼脂糖凝胶电泳详细过程与步骤分析.pptVIP

琼脂糖凝胶电泳

Agarosegelelectrophoresis天然琼脂（agar):又名琼胶、菜燕、冻粉是从石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高聚物。琼脂糖（agarose)半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷D-半乳糖核酸凝胶电泳是分子克隆核心技术之一,用于分离、鉴定和纯化DNA或RNA片段1.因不含硫酸根和羧基,几乎消除了琼脂的电渗2.对蛋白质吸附极微,故无拖尾现象。3.凝胶结构均匀,孔径较大,可用来分离酶的复合物、核酸、病毒等大分子物质。4.透明度较好,可直接或干燥成薄膜后进行染色。5.不吸收紫外光,可直接利用紫外光吸收法作定量测定6.样品易回收,常用于制备。琼脂糖凝胶电泳的优点缺点1.机械强度差,易破碎,浓度不能太低。2.易被细菌污染,不易保存,临用前配制。3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散,电泳后必须立即固定染色。4.与PAGE相比,分子筛作用小,区带少。一、实验目的掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。二、实验原