基因工程的运输工具.pptVIP

2.基因的针线──DNA连接酶切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，你觉得可以用什么酶?DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点?阅读思考:

作用:将双链DNA片段缝合起来恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键01种类:E.coliDNA连接酶:来源与大肠杆菌T4DNA连接酶:来源与T4噬菌体02差别：E.coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接;T4DNA连接酶既可以缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可以缝合”双链DNA片段的平末端,但连接平末端之间的效率比较低.03

想一想:DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链双链单链作用用于基因的表达载体的构建DNA扩增复制连接部位在两DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3’末端的羟基上，形成磷酸二酯键

答：不是一回事。DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键（在相邻核苷酸的3位碳原子上的羟基与5位碳原子上所连磷酸基团的羟基之间形成)，那么，二者的差别主要表现在什么地方呢？DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷