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- 2026-11-05 发布于境外
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一、实验目的
学会使用UV-2550型紫外-可见光分光光度计。
掌握紫外—可见分光光度计的定量分析方法。
学会利用紫外可见光谱技术进行有机化合物特征和定量分析的方法。
二、实验原理
基于物质对200-800nm光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测定方法称为紫外—可见吸收光谱法或紫外—可见分光光度法。紫外—可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生,同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁,因此吸收光谱具有带宽。紫外—可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律,被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比,即:
其中A是吸光度,I、I0分别为透过样品后光的强度和测试光的强度,ε为摩尔吸光系数,b为样品厚度,c为浓度。
紫外吸收光谱是由于分子中的电子跃迁产生的。按分子轨道理论,在有机化合物分子中这种吸收光谱取决于分子中成键电子的种类、电子分布情况,根据其性质不同可分为3种电子:(1)形成单键的σ电子;(2)形成不饱和键的π电子;(3)氧、氮、硫、卤素等杂原子上的未成键的n电子。
图1.基团中的σ,π,n成键电子
当它们吸收一定能量ΔE后,将跃迁到较高的能级,占据反键轨道。分子内部结构与这种特定的跃迁是有着密切关系的,使得分子轨道分为成键σ轨道、反键σ__轨道、成键π轨道、反键π__轨道和n轨道,其能量由低到高的顺序为:σπnπ__σ__。
图2.分子轨道中的能量跃迁示意图
仪器原理是
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