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- 2026-11-06 发布于重庆
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胚胎工程技术流程(以牛为例)汇报人:文小库2025-11-16
目录02体外受精与早期胚胎培养01卵母细胞与精子的获取与处理03早期胚胎发育阶段04胚胎操作技术05受体牛处理与妊娠管理06衍生技术应用
01卵母细胞与精子的获取与处理
010204030506活体采卵卵泡穿刺卵丘剥离选择健康良种母牛,注射促卵泡激素进行超数排卵。成熟率检测形态筛选受精验证培养体系质量控制成熟培养采卵准备通过B超引导穿刺卵泡,抽取卵泡液获取卵母细胞复合体。卵泡抽吸在体视显微镜下挑选具有完整卵丘细胞的卵母细胞复合体。卵母细胞筛选将卵母细胞置于含激素、血清和生长因子的成熟培养液中。体外成熟在38.5℃、5%CO2的培养箱中培养22-24小时。培养条件观察第一极体排出情况,评估卵母细胞核质成熟状态。成熟评估采集流程效果评估良种母牛卵母细胞的采集与体外成熟培养
人工采精方法采用假阴道法或电刺激法采集公牛精液,需避免污染并保持精液温度恒定,采集后立即进行质量检测。精液品质检测评估精子密度、活力(直线运动比例)、畸形率等参数,优质精液需满足活力70%且畸形率15%的标准。精子获能诱导将精液置于含肝素或咖啡因的获能液中孵育,去除精浆抑制因子并激活精子跨膜离子通道,促进顶体反应发生。密度梯度离心法通过Percoll或BoviPure梯度离心分离高活力精子,去除死精和杂
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