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肝素酶活力的测定

Determinationoftheactivityofheparinlyase

1范围

本文件描述了测定肝素酶活力的分光光度法。

本文件适用于生化试剂肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ活力的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

肝素酶活力单位heparinlyaseactivityunit

1000μL底物溶液(5.2.2、5.2.3、5.2.4)在30℃、pH7.0的条件下,每分钟酶解产生1μmol4,5-不饱和糖醛酸所需的酶量。

注:酶活力单位以IU表示。1IU=1.667×10-8mol/s。

4原理

肝素酶催化底物肝素钠或硫酸乙酰肝素裂解,会生成裂解产物4,5-不饱和糖醛酸。4,5-不饱和糖醛酸在波长232nm具有特征吸收峰。通过测定232nm处的吸光度变化,结合4,5-不饱和糖醛酸在232nm的摩尔消光系数,计算酶活力。

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