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转移DNA.pdf

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— 460 — 《生命的化学》200 1 年 2 1 卷 6 期 ( ) 文章编号 200 1    转 移 D NA 导表达 ; chvD 编码一种 A TP 结合蛋 白,在低 p H 值 和磷酸饥饿时可诱导 Vir G 保持一定的表达水平 ; Chv G 和 Chv I 蛋白可能与农杆菌在植物伤 口组织酸 张杰道  孟祥兵 性环境下存活有关 ;AcvB 是一种与 TDNA 结合的 ( 山东农业大学生命科学学院 ,泰安 27 10 18 ) 周质蛋白,VirJ 可能是其功能同源蛋 白; att 突变会 导致细胞外膜和周质蛋 白合成异常 ,从而抑制农杆   关键词 :农杆菌 ; TDNA ; v i r gene ; chv gene 菌附着 ; cel 基因控制一种含脂多糖的合成 , 以合成 中图分类号 :Q78 纤维细丝使农杆菌紧密附着在植物细胞表面 。这些 基因的突变能使农杆菌的运动 、附着能力的丧失 , 因   农杆菌能够将其环状质粒上的一段转移 DNA 而 chv 基因决定农杆菌的宿主范围。 (transfer DNA , TDNA) 转移并整合到受体细胞的基 2 . vir 基因的诱导表达 因组中 ,并使之携带的基因在受体细胞中表达 。利 Vir 区基因的表达需要信号物质的诱导 。V i rA 用这种天然载体转化系统 , 除了可以在细菌间进行 基因编码一种 92 kD 的膜结合受体蛋白,VirA 蛋白 接合转移外 ,还可以向真菌 、放线菌等低等真核生物 的N 端有两个功能域 ,一个能感受温度和p H 值的变 和许多高等植物基因组转移[ 1 ] 。利用人工构建的转 化 ,另一个能感受酚类物质的存在 。作为酚类物质 移复合物可以将 DNA 转运到哺乳动物的细胞核中[2 ] 。 的受体 ,VirA 蛋 白的 N 端构象发生变化 , 并将这一 虽然不同农杆菌质粒 DNA 同源性有较大差异 , 信号传至 C 端 ,修饰 His 残基使其活化 。活化的 Vi 但仍有一些共有的保守区段 ,如 TDNA 区、Vir 区、 rA 蛋白具有蛋 白激酶的活性 ,将 His 残基上的磷酸 质粒复制起始区、质粒接合转移毒性区等 。其中 T 基团转移到 Vir G 蛋 白上保守的 Asp 残基上使其活 DNA 区和 Vir 区是与 TDNA 转移直接相关的区域 。 化 。Vir G 活化蛋白的C 端具有 DNA 结合活性 ,能以 TDNA 区是基因工程载体中外源基因的承载区 ,其右 多聚体的形式结合到 v i r 基因启动子上游作为转录 边界相对左边界更为重要 。Vir 区在物理图谱上位于 激活因子促进其他 v i r 基因的表达 。 TDNA 右侧 ,Vir 区基因虽然不整合到植物基因组中 V i r 基因的表达受小分子酚类和糖类物质的双 去 ,但其表达却是诱导 TDNA 转移所必需的。 ( ) 重调节 。在众多的酚类信号物质中 , 以 羟基 乙酰 农杆菌介导的DNA 转移过程大致如下 :在酚类 丁香酮 、乙

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