水稻转基因技术与转基因水稻.pdf

维普资讯 发展与对策 ·综述 中码带米 2005年第5期 水稻转基因技术与转基因水稻 唐 丁 郭龙彪 钱 前 摘 要 ：转基因技术 的发展促进 了转基 因水稻的选育。本文 转化载体系统，成功率高，遗传稳定性好，可以连接不同的启 着重介绍 了水稻转基 因方法及利用转基因技术选育的转基 因水 动子，使外源基因在不同组织里特异表达，且载体可容纳大 稻： 片段的异源DNA，所 以该方法是 目前最常用的转基因方法。 关键词：水稻；转基因技术；品种选育 3．其他水稻转基因方法 PEG转化法是禾谷类作物转化方法中最早应用方法之 转基因技术就是将外源基因通过生物 、物理或化学手段 一 。 主要原理是利用化合物聚乙二醇 (PEG)及高pH条件诱导 导入其它生物基因组，以获得外源基因稳定遗传和表达的遗 原生质体体外摄取外源DNA。原生质体作为受体具有群体数 传改良体。自1983年世界上首例转基因植物——一种含有抗 大，便于操作 ，DNA分子易于进入，获得纯合性的转化子等优 生素药类抗体的烟草在美国成功培植以来 ，全球范围转基因 点，但原生质体培养难度大、再生频率低 、周期长、不适合水 作物的种植面积和销售收入均以倍数增长。2004年，转基因 稻转化研究。 作物面积 (主要是大豆 、玉米、油菜和棉花)已达 11250万 电激法也是以原生质体为受体的转化方法。其原理是利 h ，已被批准可使用的产品有 1000多种。水稻作为世界上 用短暂的电场脉冲作用 ，使原生质体膜形成可逆的瞬间通 最重要的粮食作物之一，自1988年首次获得可育的转基因 道，使DNA进入细胞。其转化效率高于PEG法，但 目前很少 水稻以来，基因工程技术在水稻品种改良上得到了广泛的应 应用 。 用，已选育了一系列转基因水稻品系 (组合)。本文简要介绍 花粉管通道法 ，其基本原理是利用植物授粉后一段时间 了水稻基因转化的方法及在水稻育种上的应用。 内，从珠孔到珠心之间有一条花粉管通道，外源基因可通过 一 、 水稻转基因技术 此管道进入胚囊并转化尚不具备正常壁的卵、合子或早期胚 水稻转基因技术始于原生质体培养，1985年首次成功地 胎细胞，进而借助于天然的种胚系统形成转基因种胚。该方 从水稻原生质体再生完整植株；1988年在粳稻品种中获得第 法简单、快速 、易被人接受，但机理尚不完全清楚，目前应用 一 批转基因水稻植株；l990年从籼稻品种 Chins~ Bom Ⅱ 并不是很多。 中获得第一例转基因籼稻植株；1990年李宝健等用农杆菌感 二、转基因水稻中外源基因的鉴定 染水稻组织获得转化愈伤组织 ；l991年利用水稻幼胚作为受 利用转基因方法获得的转基因植株及其产生的后代，怎 体材料，用基因枪法，成功获得转基因植株，并且转化效率明 么证明外源基因已转入受体 ，或稳定遗传?主要分以下几个 显提高?从此，幼胚作为转基因受体材料得到广泛研究应 层次鉴定：1)．外源基因整合的鉴定，主要有~uthem杂交和 用。l993年用农杆菌法在粳稻品种上获得了转基因植株，此 PCR法检测阳性。2)．外源基因转录水平的鉴定，有 No,hem 后，基因枪轰击法和农杆菌介导法作为最有价值的转化途径 杂交和 RT—PCR(reve~ transcribedPcR)检测法。3)．外源基 广泛用于水稻转基因研究。 因表达蛋白的检测，主要有三种 ：①生化反应检测法：主要通 1．基 因枪法