JJN高中二年级生物选修3基因 工程简介.pptVIP

基因的基本功能是什么？ 传递遗传信息 表达遗传信息 The camelecow 定向基因改造设想 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 为什么人的基因可以导入大肠杆菌内？ 为什么人的基因可以在大肠杆菌内表达？ 基因工程基础： （1）DNA的规则双螺旋结构是基因工程的物质基础； （2）不同生物共用一套密码子是理论基础； （3）运载体和工具酶的发现为基因工程的提供了技术基础。 把生物的遗传物质DNA分离出来，在生物体外，通过对DNA分子进行剪切、拼接，对生物的基因进行改造和重组，然后将重组的DNA（基因）导入适当的受体细胞内，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需的基因产物（蛋白质、多肽、酶等）。 什么是基因工程 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 表达 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三： 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 基因的剪刀——限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 基因的剪刀——限制性核酸内切酶 早在1970年，从细菌中分离得到。1994年分离到2300多种，常用200多种，主要从微生物分离。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 EcoRI —GAATTC— —CTTAAG— BamHI —GGATCC— —CCTAGG— 识别反向重复序列，切割后形成黏性末端。 基因操作的工具 限制性内切酶EcoRI A P C P G P T P A P C P G P T P 限制酶切割的是哪个部位的键? 连接的部位 磷酸二酯键（梯子的扶手） 而不是氢键（梯子的踏板）。 结果 两个DNA相同的黏性末端连接起来。 基因的针线——DNA连接酶 作用 将外源基因送入受体细胞。 常用的运载体 质粒 噬菌体 动植物病毒等 基因的运输工具——运载体 1.假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 2.作为载体没有切割位点将怎样? 3.目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉? 4.如果载体对受体细胞有害将怎样? 1.能自我复制. 2.有切割位点. 3.有标记基因. 4.对受体细胞无害. 什么是质粒 存在于细菌以及酵母菌等生物中 细胞染色体外能自主复制的双链环状DNA分子 细菌的质粒比细菌DNA小得多 带有少量基因 常有抗生素抗性基因,使细菌有抗药性 质粒与宿主细胞的关系 质粒的存在对宿主细胞无影响， 质粒的复制只能在宿主细胞内完成 质粒（最常用的运载体） 质粒分子结构示意图 什么是基因工程? 基因操作的工具酶主要有哪几种? 基因的剪刀是什么? 其主要作用是什么? 基因的针线是什么? 其主要作用是什么? 基因的运输工具是什么? 最常用的运载体有哪些? 质粒的结构怎样? 基因操作的基本步骤 1. 提取目的基因 化学方法合成 目的基因的序列是已知的，如胰岛素基因或PCR扩增目的基因 从基因文库中寻找 用限制酶切割 同种限制酶切断 目的基因插入质粒切口 加适量DNA 连接酶 形成重组DNA分子 质粒 目的 基因 露出黏性末端 露出黏性末端 2. 目的基因与运载体结合 ——DNA重组步骤（以质粒为例） （相同） 至少切几个键？ 切几个键？ 经同种限制酶切割的许多目的基因与许多质粒 混合，加DNA连接酶，可能会出现几种结合情况？ （假设两两结合） 3. 将重组DNA分子导入受体细胞 方法 物理：基因枪、显微注射、电激等； 化学：磷酸钙沉淀、氯化钙、脂质体等； 生物：病毒侵染、细菌感染等；