微生物生物学实验指导(生物学理科基地教材).docVIP

目 录 实验规则…………………………………………………………………………………… 实验一 环境中微生物的检测实验二 细菌的简单染色实验三 细菌的革兰氏染色实验四 细菌的芽孢染色……………………………………………………………实验五 细菌的荚膜染色………………………………………………………………………1实验六 细菌的鞭毛染色及其运动性观察……………………………………………………1实验七 放线菌的形态观察……………………………………………………………………1实验八 酵母菌形态及细胞结构的观察………………………………………………………实验九 形态观察………………………………………………………………实验十几种常用培养基的制备……………………………………………………………实验十 高压蒸汽灭菌和干热灭菌…………………………………………………………实验十 噬菌体效价的测定…………………………………………………………………实验十大分子的水解………………………………………………实验十 微生物对糖的利用……………………………………………………………………………………………………………………48 实验十 温度对微生物生长的影响…………………………………………………………实验十 pH值对微生物生长的影响………………………………………………………………………………………………………………55 实验十九 抗生素对微生物最低抑制浓度（MIC）的测定…………………………………57 实验大肠杆菌生长曲线的测定…………………………………………… …………实验二十显微镜下直接计数…………………………………………………………实验二十 显微镜下测量微生物细胞的大小………………………………………………………………………………………………70 实验二十 稀释法分离土壤微生物……………………………………………附录Ⅰ…………………………………………………………………………8 附录Ⅱ……………………………………………………………………………9 参考文献…………………………………………………………………………9 实 验 规 则 按时上课，不得迟到早退。如有疾病不能上课者，应向任课教师提供医院证明。 实验前请先预习《微生物生物学实验》相关内容，明确实验目的、原理、操作方法，以保证实验顺利进行。 做实验时要严格遵守实验纪律及操作规程，培养严肃认真的科学态度。不得随意涂改、编造实验数据，对实验结果进行认真分析。 在实验台上除实验用具和实验指导外，不得乱放其它物品。勿将菌液、染液、药品等洒在桌面上或地面上，如有菌液污染桌面或地面时，不要随便涂抹，应该用75%酒精或5%石炭酸溶液消毒。 实验过程中保持实验室肃静，不得随便走动，不得高声谈笑。 接种时必须严格遵守无菌操作规程，不得讲话。接种用的接种环、接种针及其它接种用具，在使用前后必须经过火焰灭菌或放在指定的消毒器皿内，不得随便放置。 实验完毕时，必须整理实验台，擦净桌面，打扫地面后方可离开。 爱护仪器、用具。节约药品，并按指定方法使用，不得自己乱用。如有损坏或故障必须及时报告指导教师，并登记在物品损坏登记簿上。 按时观察实验结果，以实事求是的科学态度完成实验报告，力求简明准确。实验报告包括实验目的、原理、方法、结果及回答问题（讨论）等五部分内容。字迹要清楚，绘图用铅笔。 实验一 环境中微生物的检测 目的 1．用实验证明在我们生活的环境周围存在着各种各样的微生物； 2．了解无菌操作在微生物实验中的重要性。 原理 微生物生活在我们周围，其中有些附着于尘埃上，有些漂浮于大气中，还有些沉降在各种物体的表面。土壤中微生物的种类和数量最多。此外，在人体和动物体的口腔、呼吸道、消化道以及动植物体表都存在着各种各样的微生物。由于这些微生物个体微小、结构简单、人们很难用肉眼看到，因而常常忽略了它们的存在。有些微生物种类对我们人类有益，有些则往往能引起工农业产品及实验室中各种实验材料的污染。在实际工作中，必须牢固建立无菌操作概念，熟练各种微生物操作技术，防止杂菌污染。在我们生活的环境中存在着种类繁多的微生物，在适宜的温度下，将这些微生物接种到适合于它们生长的固体培养基表面，经过一段时间，即可由单个菌体或孢子生长、繁殖形成一个个肉眼可见的菌落。根据各种微生物菌落形态的不同，即可初步辨别出细菌、放线菌、酵母菌和丝状真菌。 材料 1．5套无菌培养皿 2．150ml细菌培养基（LB） 方法 制备培养基平板：点燃酒精灯，取5套无菌培养皿置于左手边，再取1瓶熔化好的培养基置于右手边，按照无菌操作法即右手拿好培养基三角瓶，左手拔下棉塞，并在火焰上轻烧瓶口，边烧边转动。然后用左手大拇指和食指打开皿盖使成45°角，向每皿中到入约15毫