第14章基因工程.pptVIP

第 二 节 重组DNA技术 相关概念 DNA克隆 工具酶 目的基因 基因载体 基本原理 重组DNA技术与医学的关系 （二）工具酶 限制性核酸内切酶 DNA聚合酶Ⅰ T4DNA连接酶 逆转录酶 碱性磷酸酶 末端转移酶 Taq DNA聚合酶 （三）目的基因 （target DNA）－“乘客” 基因组DNA (genomic DNA) 一个细胞或生物体整套遗传信息的所有DNA序列 能自主复制； 具有两个以上的遗传标记物，便于重组体的筛选和鉴定； 有克隆位点（外源DNA插入点），常具有多个单一酶切位点，称为多克隆位点（MCS）； 分子量小，以容纳较大的外源DNA。 （一）目的基因的获取 1. 化学合成法 要求：已知目的基因的核苷酸序列或其产物的氨基酸序列 。小分子多肽基因 2.基因组DNA文库(genomic DNA library) 3. cDNA文库(cDNA library) 4. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR) （见第22章） Dr. Karry Mullis 1985年发明，获1993年度诺贝尔化学奖PCR (Polymerase chain reaction) 是用一对寡聚DNA作为引物，通过加温变性－退火－DNA合成的多次循环，使目的DNA片段得到扩增。由于这种扩增