基因工程概述.pptVIP

1.将目的基因导入植物细胞（农杆菌介导转化技术） 2.将目的基因导入动物细胞（显微注射技术） 3.将目的基因导入微生物细胞 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是: （1）用CaCl2处理细菌，以增大细菌细胞壁的通透性。 （2）使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。 （3）目的基因在受体细胞内，随其繁殖而复制，由于细菌繁殖的速度非常快，在很短的时间内就能获得大量的目的基因。 步骤四：筛选出获得目的基因的重组细胞 四环素 抗性基因 氨苄青霉 素抗性基因 步骤五：培养受体细胞并诱导目的基因的表达 重组的DNA分子进入受体细胞后受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。 受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？ 若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。 思考：依照中心法则分析番茄软化的原因： 多聚半乳糖酸酶基因 mRNA 多聚半乳糖酸酶 细胞壁结构被破坏 番茄软化 转录 翻译 哪些新技术能大大简化基因工程的操作技术？ 1、DNA测序仪： 2、PCR技术： 能快速地测定DNA样品的碱基序列。 在体外通过酶促反应有选择的大量扩增目的基因或序列的技术。 ① 概念：PCR全称为聚合酶链式反应技术，是一项在体外通过酶促反应有选择地大量扩增目的基因或序列的技术 。 ③条件：目的基因或序列、四种脱氧核苷酸、DNA聚合酶、一对引物(做启动子) ②原理： DNA复制 ④方式：以指数方式扩增。 ⑤结果： 选修3 P14 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 利用PCR技术扩增目的基因 ①90-95℃变性 ② 50-65℃退火 ③70-75℃延伸 PCR反应过程： 20-40个PCR循环 1个PCR 循环 PCR扩增原理 引物 延伸 延伸 5’ 5’ 3’ 3’ 变性、退火 变性、退火 过程： a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板 在热作用下，_____断裂，形成___________ b、退火（复性50℃-65℃）：系统温度降低，引 物与DNA模板结合，形成局部________。 c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从 引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补 的________。 氢键 单链DNA 双链 DNA链  第一节 基因工程概述 定向改造基因设想 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 基因工程的诞生和发展 艾弗里：证明ＤＮＡ是主要的遗传物质 沃森和克里克：阐明ＤＮＡ双螺旋结构 尼伦贝格：破译遗传密码 1973年:美\科恩：将两种不同来源的ＤＮＡ分子进行体外重组，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，创立了定向改造生物的新技术--基因工程。 什么是基因工程？ 基因工程（gene engineering）是指在体外通过人工 “剪切”和“拼接”等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内并使重组基因在受体细胞中表达, 产生人类需要的基因产物的技术。又叫DNA重组技术。 （一）基因工程的概念 概念的把握 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 优点 本质 DNA重组技术 体外 基因 分子水平 获得人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 →导入 → 表达 定向改造生物 基因重组 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 导入 普通棉花(无抗虫基因) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 重组DNA 形成 关键步骤一： 关键步骤二： 关键步骤三： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 形成重组DNA分子 重组DNA导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ （二）基因工程的工具——酶和载体 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： “分子手术刀”—限制性内切酶 “分子针线”—DNA连接酶 “分子运输车”—载体 （二）基因工程的工具——酶和载体 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： “分子手术刀”—限制性内切酶 “分子针线”—DNA连接酶 “分子运输车”—载体 １、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 限制酶 大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开DNA。 思考： ①限制酶所识别的序列有什么特点？ ②限制酶