转美洲拟鲽抗冻蛋白基因（AFP）番茄的叶片电导率测定.pdfVIP

维普资讯 嚣 峰．每e(、 ，7一 f杰({一 转美州拟鲽抗冻蛋白基因(AFP)。 番茄的叶片电导率测定 ． 傅桂荣 张初l／赵晓祥一汪清胤黄永 、 了 。 ——_ — 范蝌生翱 5。㈣ ／ fu U 对转姜州拟鲜航冻蛋白基因(AFP)的第三代(D)番茄及其对照。经低温处理后 进行幼苗叶片组织电导率制定。发现转基因各组电导卑均比对照明显降低，说明导八 的AFP基因已经表达并使番茄菇得抗寒性。 、 关键词．苎坐 兰!墨盟兰苎兰塑 哇哆、H 、 J， 早在 1930年。Denter、Lyonsdg首先提 定其抗寒性。 f 出用电导率测定植物的抗寒性 I【]。几十年来 材料与方法 人们对叶片电导率与植物抗寒性关系有了进 一 一 步了解．植物受到低温影响时，细胞的质膜 、 材料 透性会发生不同程度的增大，电解质会有不 以本实验室转AFP基因的番茄种子 中 同程度的外渗．以致于电导率会有不商程度 蔬四号 ，经DJ、D：代鉴定过的T一2、T～5、 的加大。抗寒性较强或受害较轻的植物不仅 T一7、T一8、T一9T一1O、T—l】各组份单 膜透性增加的程度较小，并且透性的变化可 果采收的种子 (编号T一2ABC等)共 28份， 以逆转．反之抗寒性较弱或受害较大的植物， 及未转基因的。中蔬四号 (对照)为材料，经 膜透性大幅度增加，并且不可逆转．以至于造 种子消毒催芽处理后，播种于温室。一周左右 成伤害甚至死亡，这种变化明显地出现在外 至子叶完全展开时的幼苗(1h代)用于实验。 部形态的变化之前，因此反应膜透性的电导 二、实验材料的低温处理 率的测定。可作为植物的鉴定指标。 1．不同低温对番茄苗电导率的影响 我们以前的工作，巳将整台在Ti质粒上 将转基因的。中蔬四号 25株幼苗，分 的美洲拟蝶抗冻蛋白基因导入番茄，获得转 五组，首先在5C的室外气温条件下，预冷16 基因番茄。通过对 D、D：代的田同观察 小时以诱导抗冻蛋白基因的表达，然后移到 Southern杂交分析、同工酶检测及叶绿素 维 冰箱内作--20℃、一15℃、一10℃2O分钟三 生素C及叶片游离氨基酸种类和含量分析， 种低温处理，取出后在23℃室温下恢复一小 说明AFP基因巳整台到番茄染色体上井表 时． 达，转基因番茄获得了一定抗寒性．本实验通 2．转AFP基因番茄苗的电导率测定 过对D。代叶片组织电导率的测定，进一步鉴 将供试各组。每组取 5株先在5℃温度 下预冷 16h，然后放在