豆类根瘤发育中的信号物质研究.ppt

豆科根瘤分子细胞生物学（一）（豆科根瘤发育中的信号物质研究进展） 焦成瑾 2007. 12. 06 光合作用与生物固氮是自然给予人类的两大贡献，它 们分别提供了植物生长的碳源和氮源，从而提供了人 类社会发展的最基础的物质条件，是农业生物学最基 础的研究课题。 生物固氮是指由固氮微生物将氮气转化为氨的过程。 1995年联合国粮农组织（FAO）粗略估计，全球每年 由生物固定的氮量近 2×106 t，约占全球植物需氮量 的3/4。 植物所能利用的氮素 1 无机态氮，即铵态氮（NH4+）和硝态氮（NO3-）。 2 有机态氮，如尿素等。 这些氮素的来源？ 生 物 固 氮（固氮微生物） 1 共生固氮 如根瘤菌与豆科植物； 2 联合固氮 如放线菌与非豆科植物。 3 自生固氮 如圆褐固氮菌（好氧）； 梭菌（厌氧）。 共 生 固 氮 自然界有豆科植物19700种，其中已知可以 结瘤固氮的有2800种，占15％，而对其共生 固氮体系进行过研究的只占0.5％。 豆类植物根瘤形成的主要过程 一 豆类植物根分泌黄酮类物质 二 根瘤菌分泌结瘤因子 三 豆类植物与根瘤菌的相互识别 四 豆类植物对根瘤菌的反应 五 根瘤发育 六 根瘤成熟并开始固氮 一 豆类植物根分泌黄酮类物质 1 促进根瘤菌生长 2 对根瘤菌的趋化作用 3 对根瘤菌结瘤基因的诱导 4 在根瘤发育与固氮中的作用 5 环境因素对黄酮类物质分泌的影响 常见豆类诱导结瘤的黄酮类物质 二 根瘤菌分泌结瘤因子 1 结瘤因子的结构 2 结瘤因子的合成 3 结瘤因子的功能 1 结 瘤 因 子 的 结 构 2 结瘤因子的合成及结瘤基因 结瘤因子由黄酮类物质诱导根瘤菌的结瘤基因 表达而最终合成。 1）共同结瘤基因 2）结瘤调节基因 3）宿主专一性基因 4）其它结瘤基因 1）共同结瘤基因 nodA、B、C 是根瘤菌中最保守的基因，即在不同的根瘤菌中同源性很 高，功能上可以在不同根瘤菌之间相互交换而不改变其宿 主范围，一种根瘤菌的基因突变可以被其它根瘤菌的相应 基因所互补。 nodABC 在基因组内是紧密连在一起的，位于同一操纵子的3个阅读框架 中，转录方向一致。 nodA 酰基转移酶，将长链脂肪酯连接到聚乙酰氨基葡糖分子非还原端。 nodB 脱乙酰酶，催化聚乙酰氨基葡糖分子非还原端脱乙酰基反应。 nodC 表达的蛋白NodC位于膜上，与聚乙酰氨基葡糖合成酶高度同源， 在N —乙酰葡萄糖胺之间形成β-1,4糖苷键所必需。 2）结 瘤 调 节 基 因 nodD是结瘤正调节基因，在根瘤菌中普遍存在，它的表达是组成型的， 其蛋白在根际与特定的黄酮类物质结合后可以激活nodABC及其它一系 列结瘤基因的表达。 在nodABC的上游区，有一段高度保守的序列，称为结瘤盒（nod-box）, 大约25-50bp，不同根瘤菌此序列长短不一，是一段调节序列，为结瘤基 因转录激活所必需， nodD的产物NodD蛋白的N末端就结合在一这位 置，而其C末端与特异的黄酮类化合物结合。 nodD在不同的根瘤菌中拷贝数不同，在多数根瘤菌中只有一个，但有些 为3，甚至5个。 由于NodD蛋白与特定的黄酮类物质结合后，才能激活相应的结瘤基因， 所以nodD在一定程度上决定根瘤菌的宿主专一性。 3）宿主专一性基因 不同的根瘤菌此类基因不同，基因种类也不完全一样，它们 中大部分在根瘤种内功能是保守的，可以互补，种间功能不 能互补。其功能是影响根瘤的结瘤速率一数量，更主要的是 影响宿主专一性，它们的突变，会引起宿主专一性的丧失或 扩大宿主范围。如nodE、F、G、H、P、Q、M、N、L、I 等。 它们中有些与结瘤因子侧链的化学修饰有关，有些其功能目 前仍不确定。 4）其 它 结 瘤 基 因 根瘤菌在侵染宿主根毛细胞时，必须能被根毛细胞所识别， 因此有许多基因决定其细胞表面组分的合成，它们包括合成 根瘤菌胞外多糖的exo基因，脂多糖的lps基因，合成荚膜多 糖、K抗原和β-1, 2-葡聚糖的ndv基因。 上述基因的突变将不同程度扰乱根瘤菌的侵染过程。 3 结瘤因子的功能 参见：豆类植物对根瘤菌的反应 结瘤因子除了能引起宿主根毛细胞产生反应 外，还能对非豆类植物产生多方面的生理效