课题研究报告1.pptVIP

第四组： 组长：梁嘉健 副组长: 魏辉红 黄宇凌、周国月、陈梓、邝舒敏、丁容、江倩仪、麦毅明 概述 维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。 方法 磷钼蓝分光光度法 原理 磷酸盐与钼酸铵在酸性溶液中反应生成黄色的磷钼酸铵。 磷钼酸铵有很强的氧化活性, 能将还原型维生素C 氧化成L- 脱氢抗坏血酸, 而磷钼酸铵本身被还原成磷钼蓝。 材料 菠菜、菜心、芥菜、芥蓝、紫菜心、枸杞菜。 配液 3mol/l H2SO4:取98%浓硫酸 81.5ml，加入蒸馏水定容到500ml。 草酸-EDTA溶液：称取6．3000 g草酸和0．0750 g EDTA，充分溶解后用蒸馏水定容至1 000 mL. HAc-NaAc 缓冲溶液: pH= 5.5; 冰醋酸加入NaOH调节PH为5.5 NaH2PO4 溶液: 质量分数为2%水溶液。2g NaH2PO4加入98ml水。 (NH4) 2MoO4 溶液: 取5.0 g ( NH4) 2MoO4 于250 mL 小烧杯中, 加入150 mL 蒸馏水, 加热溶解, 冷却后至250 mL容量瓶中, 加3 mol/L H2SO4 溶液15 mL, 蒸馏水稀释至刻度, 摇匀。 Bi ( NO3) 3-H2SO4 溶液: 称取2. 5 g Bi ( NO3 ) 3·5H2O 于小烧杯中, ; 加3 mol/L H2SO4 溶液100 mL 溶解, 转移至250 mL 容量瓶中, 3 mol/L H2SO4溶液稀释至刻度。 维生素C溶液：取0.1g维生素粉末，加入草酸-EDTA溶液定容至100ml. 步骤 样品： 将样品15g研磨（加入二氧化硅），加入20ml草酸-EDTA溶液脱色和防氧化（先加15ml研磨后倒进离心管，然后加5ml把残留在石磨的渣湿润后，倒入离心管）,离心，5 000 r／min离心10 min。过滤取清液加入草酸-EDTA溶液用100ml容量瓶定量。 在小烧杯中依次加入NaAc-HAc 缓冲溶液3 mL, ( NH4) 2MoO4 溶液3 mL,NaH2PO4 溶液2 mL, Bi ( NO3 ) 3溶液1 mL, 摇匀, 然后吸取10ml的试液, 85度 恒温水浴10 min 使反应完全, 冷却至室温，加入比色管于波长700nm 处测量吸光度。 其中，空白组要加入10ml的草酸-EDTA（由于草酸也是一种还原剂能被氧化，为了排除草酸对实验的影响，所以加入相同的量） 维生素C： 取5个小烧杯, 依次加入NaAc-HAc 缓冲溶液3 mL, ( NH4) 2MoO4 溶液3 mL, NaH2PO4 溶液2 mL, Bi ( NO3) 3-H2SO4溶液1 mL, 取新配的维生素C 标准溶液，分别加入0.25、0.50、0.75、1.00、1.25ml后加入草酸EDTA溶液9.75、9.5、9.25、9.0、8.75ml。85度 恒温水浴10 min 使反应完全, 冷却至室温于波长700nm 处测量吸光度,测定吸光度并制作工作曲线. 结果 分光光度计测定维生素C含量的图 含量 网上的参考值 讨论 以菜叶为例，菠菜与参考值相差甚远，可能菠菜中含有一些能与磷钼酸铵反应的物质，使数据偏大。而芥蓝，可能维生素C含量较多的地方时茎部，而非叶，又或者因为实验有实验的失误导致芥蓝中得维生素C被氧化了。 而菜茎，由于定容至50ml，使维生素C的浓度增大2倍，取10ml再加入试剂后，维生素C含量大于磷钼酸铵的含量，生成了鉬蓝沉淀，最后使测量出来的数据不准确。 实验中的错误 在第一次实验，NaH2PO4 溶液与 Bi ( NO3 ) 3溶液混合后出现白色沉淀，于是估计溶液酸性过低导致Bi3+水解，生成沉淀。经过查阅，改变配置Bi ( NO3 ) 3溶液方法，在第二次实验解决。 在第二次实验中，测量蔬菜和维生素C溶液时，依次加入NaAc-HAc 缓冲溶液3 mL, ( NH4) 2MoO4 溶液3 mL, NaH2PO4 溶液2 mL, Bi ( NO3) 3-H2SO4溶液1 mL，后测量，颜色基本无法显色。于是估计维生素C的含量过低，无法显色。 经过计算，取1,2,3,4,5ml维生素C溶液的范围不在不在我们测定的样品参考值范围内，所以改0.25,0.50,0.75,1.00,1.25ml,然后加入草酸-EDTA溶液加至10ml去测量。 样品过滤后也将全部溶液过滤后定容。 ? 在几次实验