头发论文：人体头发中兴奋剂液相色谱串联质谱检测方法.docVIP

头发论文：人体头发中兴奋剂液相色谱串联质谱检测方法的研究 【中文摘要】本论文以易被运动员滥用或检测难度较高的兴奋剂为主要研究对象,利用具有高分离效能和结构确证功能的液相色谱-串联质谱来探索、建立毛发中兴奋剂(酯类、母体、代谢物)的检测和评价方法,并使用建立的检测方法检测高血压患者头发中的p-阻断剂(美替洛尔和比索洛尔)和运动员头发β2-激动剂(克仑特罗),以证明检测方法的有效性,为采用毛发检测兴奋剂建立技术储备。方法称取50mg头发,加入5u1d3-睾酮作内标,100μ1蛋白酶K和100μl二硫苏糖醇在三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液中55℃水解2小时,加入正戊烷/乙醚,振荡、离心和冷冻,倒出上层有机相。融化下层后加入磷酸缓冲液、5μl内标和三氯甲烷／异丙醇振荡、离心和吸取上层液体后两次有机相混合吹干,最后用甲醇、流动相A和正己烷除去油脂,复溶(90%流动相A)后10μ1进样分析。由于酯类和非酯类复溶液不同,酯类和非酯类分开处理检测,酯类50mg头发,加10μl内标同上水解方法,加入正戊烷,振荡、离心和冷冻,吹干复溶液(90%流动相B)复溶后20uμ进样分析。结果与讨论通过优化色谱和质谱条件,非酯类和酯类分别采用X BridgeRP18(3.5μm,100mm×2.1mm)和Agilent ZORBAX XDB-C18(3.μ m,50mmX2. lmm)色谱柱,相对应的流速为0.2ml