第4章 培养基.ppt

第四章 培养基 1 、概述 2 、培养基的成分 3、培养基的种类与选择 4、发酵工业培养基配制的原则 5、影响培养基质量的因素 1、概述 培养基——人们提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 培养基组成对菌体生长繁殖、产物的生物合成、产品的分离精制乃至产品的质量和产量都有重要影响。 1.1、培养基条件与微生物生理学和形态学的相关性 培养基条件是指培养基组成、pH值、二价阳离子、阴离子聚合物、表面活性剂和固形物含量等。 培养基条件可影响菌丝形态。二价阳离子易引起菌丝体呈球状体生长。 培养基条件可改变细胞表面组成而影响菌体形态。 培养基组成可改善细胞通透性。 1.2、配制工艺发酵培养基的一般要求 营养物质的组成比较丰富，浓度恰当，能满足菌种发芽和生长繁殖成大量的有生理功能的菌丝体之需要，能显示出产物的合成能力； 在一定条件下，所采用的各种原材料彼此间不能发生化学反应，理化性质相对稳定； 黏度适中，具有适当的渗透压； 要考虑所选的原材料的品种和浓度与代谢产物生物合成过程中的调节关系，要有利于主要产物的生物合成并能维持较长时间的最高生产速率，不需要的产物的合成速率降至最低； 生产过程中，不影响通气与搅拌的效果，也不影响或稍影响产物的分离精制和废物处理； 选用的原材料尽量做到因地制宜、质优价廉、成本低。 2 、培养基的成分 工业上主要作为碳源的基质 工业上主要作为氮源的基质 工业上主要作为无机盐和微量元素的基质 其他成分 发展方向 2.1、工业上主要作为碳源的基质 糖类：如蔗糖、红糖或褐糖、糖蜜等； 麦芽汁（大麦小麦等糖化所得）； 淀粉（甘薯淀粉、玉米淀粉、大米淀粉等）； 脂肪（油脂）； 有机酸、醇（甲醇、乙醇等）； 碳氢化合物。 目前正在开发利用的碳源有： （1）纤维素； （2）木质素； （3）烃类（包括甲烷）。 2.2、工业上主要作为氮源的基质： 玉米浆； 大豆饼； 鱼粉； 棉籽饼粉； 酵母浸出物; 蛋白质水解物; 发酵残液。 2.3、工业上主要作为无机盐和微量元素的基质 磷酸二氢钾、磷酸氢二钾及其钠盐； 硫酸亚铁； 硫酸锌、硫酸镁、氯化镁、氯化钴等； 氯化钠、氯化钾、碳酸钙。 2.4、其他成分 水 前体 消沫剂 生长因子 2.5、发展方向 利用废物废水，如工业废水、民用废水、牧场废水等作为碳氮源。 3、培养基的种类和选择 养分来源：天然培养基、合成培养基、半合成培养基； 制成形式：固体培养基、半固体培养基、液体培养基； 使用目的：基础培养基、完全培养基、鉴别培养基、选择培养基等。 生产工艺：斜面培养基、种子培养基、发酵培养基等。 3.1、斜面培养基（slope medium） 作用：供微生物细胞生长繁殖用的，包括细菌，酵母等的斜面培养基以及霉菌、放线菌生孢子培养基或麸曲培养基等。这类培养基主要作用是供给细胞生长繁殖所需的各类营养物质。 特点： 富含有机氮源，少含或不含糖分。有机氮有利于菌体的生长繁殖，能获得更多的细胞。 对于放线菌或霉菌的产孢子培养基，则氮源和碳源均不宜太丰富，否则容易长菌丝而较少形成孢子。 斜面培养基中宜加少量无机盐类，供给必要的生长因子和微量元素。 3.2、种子扩大培养基（seed amplification medium） 它的成分应介于斜面培养和发酵培养基之间，是一种过渡性质的培养基。 培养种子的目的： 扩大培养，增加细胞数量； 同时也必须培养出强壮、健康、活性高的细胞。为了使细胞迅速进行分裂或菌丝快速生长。 种子培养基特点： 必须有较完全和丰富的营养物质，特别需要充足的氮源和生长因子。 种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基，可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。 种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。 3.3．发酵培养基（fermentation medium） 除了满足菌体的正常生长繁殖外，主要是满足合成大量的代谢产物的需要，所以其营养物质总浓度应高于斜面培养基及种子扩大培养基。 发酵培养基一般是用价格低廉的农副产品配制而成，其中既含有速效性营养元素，又含有大量迟效性养分，从而避免反馈抑制，延长代谢产物的合成时间。 发酵培养基的选择 必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。 有利于减少培养基原料的单耗，即提高单位营养物质所合成产物数量或最大产率。 有利于提高培养基和产物的浓度，以提高单位容积发酵罐的生产能力。 有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期。 尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化。 原料价格低廉，质量稳定，取材容易。 所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响，利于提高氧的利用率，降低能耗。 有利于产品的分离纯化，并尽可能减少产生“三废”的物质。 如多粘菌素产生菌