(微)重力影响细胞生命活动的力学-生物学耦合规律研究.docVIP

项目名称： （微）重力影响细胞生命活动的力学-生物学耦合规律研究 龙勉 中国科学院力学研究所 2010.9至2015.9 中国科学院  面向载人航天的国家重大需求，在（微）重力影响细胞生命活动领域开力学-生物学耦合的新研究方向，并力争在细胞感知和响应规律、细胞间相互作用、组织发生和重建等方面提出新概念、新思想和新方法；建立可在领域前沿开展高水平研究数值模拟、物理实验的系统平台；凝聚一支具有国际影响整合力学、物理、生物学科学与等学科的交叉研究团队；在前述三个基本科学问题上取得突破性进展并发表重要科学论文；团队成员能够经常性地在国际权威学术会议上做重要学术报告，并在相关领域的国际权威学术组织和刊物编委中任职；最终为在我国空间实验室与空间站上开展科学目标明确的空间生命科学研究奠定基础，并为未来深空探测做好科学储备。 三、研究方案 1、学术思路： 本项目学术思路立足于国家重大需求基础相结合，强调科学与空间生命科学的交叉与融合，力求在研究内容设计、课题组织、研究方案制定等方面体现科学研究的前沿性和国家需求的牵引性。植物细胞对（微）重力的感、传导、响应规律等相关研究，力争在科学研究方面有创新性突破的同时，的新概念、新方法、新技术和新装置研究为未来空间实验任务提供科学储备和技术保障，并促进高新技术的地面应用与产业化。本项目开展，注重新概念、新方法和新手段的储备。本项目瞄准中的关键科学问题，典型复合物，结合实验研究与理论模拟、定性与定量手段，开展下的交叉研究，强调利用、定量等前沿研究手段与先进生物学手段的结合。 具体技术途径概述如下： 1）模型化研究：建立模型骨材料内流体输运过程的物理力学模型数值方法研究不同粘性简单流体及复杂流体在复杂多孔结构中的输运特性及规律微重力模拟：旋转生物反应器生物反应器微重力模拟：数值方法研究力学方式：流体剪切：微流控技术并结合流体力学分析培养液流动和物质输运条件细胞间相互作用与分子调控实验系统。压：利用原子力显微镜探针技术和光技术对细胞施加压力细胞间相互作用与分子调控实验系统。：采用自主研发的旋转生物反应器，通过优化旋转速度和旋转半径以避免附加较大的离心力获得屏蔽细胞对重力方向感知的旋转条件生物学效应对照组磁悬浮自主研发的抗磁物质悬浮技术平台受磁化力与重力方向相反，空间微重力环境受力状态磁场生物学效应对照组。×g）的生物学响应，以提供所需的概念性验证方案。复合载荷：研制可在模拟对细胞不同力学载荷的细胞模型：细胞模型成骨细胞、破骨细胞、骨细胞免疫（内皮细胞、肿瘤细胞）（真皮来源前体细胞、骨髓间充质干细胞胚胎干细胞）等类。脱钙骨胶原支架细胞模型构建：利用微模式化技术构建形状面积受控、具有连接尺度的细胞网络模型建立骨细胞与成骨细胞、骨细胞与破骨细胞的共培养系统细胞内皮细胞肿瘤细胞。转盘式扫描共聚焦显微镜观测细胞增殖、代谢、分泌细胞间聚集粘附的动力学过程细胞骨架动态组装和运动轨迹、速率模式传导，?-catenin、钙离子等信号通路在感知、传导以及响应（微）重力中的作用，以及力学因素对细胞物质合成、能量代谢以及信号转导的影响。 7）基因组与转基因功能的力学-生物学响应研究：利用基因芯片克隆受重力改变影响的拟南芥细胞基因相互作用关系网中的关键基因、枢纽基因，并构建上述关键基因的转基因植物（过表达、基因表达受干扰的植株）。通过遗传操作的手段改变基因表达量，并对转基因植物进行继代培养，获得纯化且可进一步开展研究的转基因植物。选择上述在重力信号转导途径中起关键调节作用的3-5个基因与报告基因（如GFP、RFP等）构成融合基因，通过转基因方法研究候选基因在过表达时或缺失（利用突变体）时植物细胞对重力的响应、候选基因与信号分子之间的关联性，初步确定（微）重力影响植物细胞骨架信号通路的关键靶点、关键基因与蛋白质，建立改变影响植物基因表达变化的调控网络。同时，开展（微）重力影响拟南芥细胞转录组的研究。 8）小RNA的力学-生物学响应研究：利用芯片分析获得（微）重力刺激下拟南芥细胞小RNA表达的动力学变化。通过测序获得大量小RNA序列，并构建小RNA文库用以对比小RNA的差异表达。利用RT-PCR分析小RNA前体的表达量和Northern杂交等手段验证差异表达的小RNA。利用生物信息学方法分析基因作用的靶点并预测其可能的功能，确定与重力感知相关的候选基因。将候选基因克隆、构建载体，在拟南芥中过量表达、观察表型。利用Target Mimicry等方法验证与重力感知相关的小RNA靶基因的功能。研究与重力感应相关的小RNA与生长素响应因子之间的相关性，探索（微）重力在细胞生命活动中的作用及影响。 9）转盘式扫描共聚焦显微镜观测细胞间聚集粘附动力学过程结构特征（孔隙率及空隙分布、贯通性、表面物理性质）弹性、强度在二维或三维