Annexin V 检测试剂.pdfVIP

联科生物技术有限公司 全国免费电话：800 8571 184 传真：0571-8822 6692 2.1. Annexin V 检测试剂/试剂盒 2.1.1. 重要性 检测早期凋亡的细胞，可同时区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。 2.1.2. 原理 细胞凋亡比较早期时，细胞膜虽未破裂，但出现了一些明显改变。其中最明显的变化是细胞膜磷脂 双分子层中的磷脂酰丝氨酸 (PS)从细胞膜内翻转到细胞膜 外，PS 因此暴露于细胞膜外。 Annexin V 是一种分子量为 35-36KD 的Ca2+依赖的磷脂结 合蛋白，与 PS 有很高的亲和 力，因此可与凋亡细胞膜上外 翻的 PS 相结合。当 Annexin V 被荧光素(如 FITC ，PE 等)标 记时，可在流式细胞仪上或荧 光显微镜下检测到早期凋亡 的细胞。 2.1.3. 特点 方便：可用流式细胞术或荧光显微镜检测； 快速：1 小时内即可完成实验； 准确：能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞，并计数各群细胞的比例。 2.1.4. 产品 联科公司提供以下几种型式的试剂/试剂盒，可用于所 有哺乳动物细胞凋亡的检测，而且适用于流式细胞术 (表格中标注为 FC)和/或荧光显微镜(表格中标注为 FM)： 全国免费电话：800 8571 184 联科杭州：0571-8822 6558 联科上海：021-6451 1079 联科北京：010-5180 5911 联科苏州：0512-6866 6623 联科厦门：0592-5322 2277 联科广州：020-8350 6317 联科武汉：139 9551 1341 联科南京： 025 18 联科生物技术有限公司 全国免费电话：800 8571 184 传真：0571-8822 6692 1) 即用型试剂盒(Kit 或 Apoptosis Kit) Annexin V* Kit Annexin V* Apoptosis Kit 其中含各种标记的 Annexin V(如 FITC, PE-Cy5, Cy3, Cy5, EGFP, Biotin 等)、PI(碘化丙啶)和结合 缓冲液(Binding Buffer)，直接使用，可区分出凋亡细胞、活细胞和坏死细胞。 检测原理 细胞凋亡与坏死的最大区别为前者的细胞膜保持完整，而后者的细胞膜破碎。PI(碘化丙啶)作为 一种可嵌入 DNA 双链的红色荧光物质，不能通过完整的细胞膜，对活细胞和凋亡的细胞均不能 染色，但可进入坏死细胞，因此可使坏死细胞发出红色荧光。通过荧光素标记的 Annexin V 和 PI 对细胞进行双染色，可将凋亡细胞、活细胞和坏死细胞区分开来，如下图： 右上区(UR)：Annexin V+/ PI+ (坏死细胞) 右下区(LR)：Annexin V+/PI- (早期凋亡细胞) 左下区(LL)：Annexin V-/PI- (活细胞) 检测步骤 收集细胞并重悬于 Binding Buffer(结合液) 中