Vigilin靶点沉默增加Hela和Bel-7402对顺铂敏感性的体外研究.doc

  Vigilin 靶点沉默增加 Hela 和 Bel-7402 对顺 铂敏感性的体外研究# 沈文燕，李冉＊，魏玲，杨文理，刘秋英，俞小琴，覃扬** 5 10 15 20 25 30 35 （四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室，成都 610041） 摘要：目的：研究顺铂对敲除基因 vigilin 的人肝癌和宫颈癌细胞株的细胞毒作用。 方法： 以 MTT 法测定顺铂分别作用 24h、48h、72h 后对 vigilin 敲除的 hela 和 Bel-7402 细胞毒作 用，以 OD 值反应活细胞数。结果：顺铂对 HeLa 和 Bel-7402 细胞有生长抑制作用, 并有时 间和浓度依赖性;顺铂分别作用 24h、48h、72h 小时后都是敲除基因 vigilin 组细胞活细胞数 最少。结论：vigilin 基因的敲除可以增加 Hela 和 Bel-7402 对顺铂的敏感性。 关键词：Vigilin 靶点沉默；顺铂；MTT；Hela；Bel-7402 中图分类号：R31 The silence of vigilin gene can increase cisplatin-sensitivity in Hela and Bel-7402 cells SHEN Wenyan, LI Ran*, WEI Ling, YANG Wenli, LIU Qiuying, YU Xiaoqin, QIN Yang (Department of Biochemistry and Molecular Biology,West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University,Chengdu 610041) Abstract: Objective:To investigate the effect of silencing vigilin gene on sensitivity of cervical cancer cells HeLa and hepatocellular carcinoma cells Bel-7402 to cisplatin(DDP).Methods:viable count of HeLa cells and Bel-7402 cells which silencing vigilin gene induced by DDP in different concentration were measured by MTT assays. Results:The growth inhibition rate of HeLa and Bel-7402 cells increased gradually, which was dependent on the dosage of DDP and the action time. the viable count of silencing vigilin gene was significantly lower than control group ( P 0. 05).Conclusion: the silence of vigilin gene can increase cisplatin-sensitivity in cervical cancer cells HeLa and hepatocellular carcinoma cells Bel-7402. Key words: the silence of vigilin gene；DDP;MTT；Hela；Bel-7402 0 引言 宫颈癌和肝癌都是致死率较高的肿瘤，近年来以顺铂(DDP )为核心的联合化疗在宫颈癌 和肝癌治疗中取得了一定进展。但是肿瘤细胞对多种化疗药物产生耐药性[1]，使化疗作用降 低。而顺铂是目前临床使用上重要的抗癌药物之一，具有较广的抗瘤谱，以顺铂为主或有顺 铂参加配伍的化疗方案占所有方案的 78%-80%。但肿瘤对顺铂的耐药性影响了顺铂的治疗 效果，并且顺铂的毒副作用也是巨大的，其中顺铂对肾脏的毒性是最常见的[2]，顺铂对细胞 周期各时相均无特异性，剂量越大抗癌效果越好，但伴随的毒副作用也越大。 人 vigilin（高密度脂蛋白结合蛋白）[3]，由 14 个串联却各不相同的 KH 结构域构成， 该蛋白从进化角度看高度保守[4-6]，已经在多种真核生物中发现其同源物，有研究表明 vigilin 参与染色质的凝缩与分离的过程，当 vigilin 敲除后，分裂期的染色体体不能高度凝集地分 基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20100181110051); 国家自然科学基金 （308