携带TRAIL的溶瘤腺病毒联合LiCl对癌细胞的生长抑制效应.docVIP

  携带 TRAIL 的溶瘤腺病毒联合 LiCl 对癌细 胞的生长抑制效应# 张媛，叶静，杨新燕，张瑾莉，周秀梅** 5 10 15 20 25 30 35 （浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018） 摘 要 ： 研 究 糖 原 合 成 激 酶 3 的 抑 制 剂 LiCl 联 合 携 带 TRAIL 的 溶 瘤 腺 病 毒 Ad.sp-E1A-E1B(55KD)TRAIL-Flag (Ad.sp-TRAIL-Flag)对肿瘤细胞的体外杀伤作用。采用 MTT 法检测癌症特异性病毒 Ad.sp-TRAIL-Flag 联合药物 LiCl 对三种癌症细胞株增殖的抑制 作用；通过结晶紫实验观察联合用药的杀伤效果；最后通过 Western Blot 实验检测联合作用 对癌细胞中 TRAIL 的表达变化。结果显示 Ad.sp-TRAIL-Flag 联合 LiCl 的处理对三种癌细胞 的增殖抑制作用明显优于病毒单独作用，且随着 LiCl 浓度的增强杀伤作用越明显。Western Blot 实验证明 LiCl 可提高癌细胞中 Ad.sp-TRAIL-Flag 的 TRAIL 蛋白表达水平，从而增强了 Ad.sp-TRAIL-Flag 通过 TRAIL 的信号通路的杀伤效果。 关键词：溶瘤腺病毒；TRAIL；LiCl；癌症细胞 中图分类号：Q The growth inhibiting effect to cancer cells by Oncolytic Adenovicus-Mediated TRAIL combined with LiCl ZHANG Yuan, YE Jing, YANG Xinyan, ZHANG Jinli, ZHOU Xiumei (Zhejiang Sci-Tech university, HangZhou 310018) Abstract: In order to investigate the killing effect of glycogen synthesis kinase 3 inhibitor LiCl combined with Ad.sp-E1A-E1B(△55KD)TRAIL-Flag (also known as Ad.sp-TRAIL-Flag) in vitro that oncolytic adenovirus carries on human tumor cells. MTT assay are used to detect inhibition on tumor cells’ proliferation by drug LiCl combined with tumor-specific virus Ad.sp-TRAIL-Flag, and combination effect on medication cytotoxicity are further detected by crystal violet experiment; In addition, western blot assays are performed to test the expression change of TRAIL. The result shows that the growth inhibiting effect of cancer cells by LiCl combined with Ad.sp-TRAIL-Flag treatment is better than using them separately, so as to enhance the express of TRAIL through the signal path killing effects. Keywords: Oncolytic adenovicus; TRAIL; LiCl; Cancer cells 0 引言 恶性肿瘤即癌症严重危害人类的生命健康。目前，恶性肿瘤正超过心脑血管疾病而成为 人类致死的第一位原因。恶性肿瘤的治疗手段包括传统的治疗方法如手术、放疗、化疗等， 这些传统的治疗手段已经出现了严重的瓶颈问题，为此刘新垣院士提出了一种癌症治疗的新 策略—癌症的靶向基因—病毒治疗(targeting gene-virotherapy of cancer) [1] 。本实验使用的 Ad.sp-E1A-E1B(△55KD)-TRAIL-Flag (简写为 Ad.sp-TRAIL-Flag)是利用 survivin 启动子代替腺 病毒 EIA 的基因启动子，使外源基因 TRAIL 仅在癌细胞中表达，同时因为删去了 E1B 上的 与 p53 基因产物结合的 55KD 蛋白，所以使其无法在正常细胞