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第三节 动物细胞工程 第三节 动物细胞工程 一 动物细胞工程概述 二 动物细胞工程涉及的主要技术领域 三 动物细胞工程研究进展与应用 一 动物细胞工程概述 从70年代开始，由于细胞融合技术的迅速发展，在生物工程中兴起了一个新领域，那就是细胞工程。 一提到细胞工程，人们常会联想到淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体，诚然这部分内容是细胞工程目前的重要项目，然而细胞工程决不限于杂交瘤和单抗，它的内容要广得多。 本章节将从动物细胞工程的各个方面予以介绍，以期引起大家的关注，从而促进这领域的发展。 一 动物细胞工程概述 什么是细胞工程? 细胞工程就是应用细胞生物学和分子生物学的方法，在细胞水平进行的遗传操作。 广义上，包括体外培养和繁殖大量的细胞获得有用价值的生物产品或细胞本身的领域。 细胞工程最终目的是生产特定的生物产品，快速繁殖和培育新的优良品种。 一 动物细胞工程概述 动物细胞工程所涉及的主要技术有组织培养、细胞融合、细胞拆合、染色体或染色体组转移、胚胎工程，以及基因转移等方面，是从细胞整体水平、核质水平、染色体水平，以及基因水平上来对细胞进行遗传操作的。 由于目前细胞学中可将核及染色体都纳入细胞器范畴，因而也可以将上述内容归并为三个层次，即整体水平(细胞融合)，细胞器水平(核移植，改变染色体倍性或组成）和基因水平(外源基因导入)。 一 动物细胞工程概述 根据目前动物细胞工程的发展现状，技术中最成熟、影响也最大的当数细胞融合。 其中淋巴细胞杂交瘤在国内外均己普遍开展，其产物单克隆抗体己经进入产业化的生产阶段，全世界大大小小的生产单抗的公司不下数百个。 一 动物细胞工程概述 核移植这一项在我国特别是培育鱼类新品种方面已有多年的研究基础。 上世纪50年代，童第周教授开始以鱼和两栖类为材料进行核移植实验，得到了核质杂种。 近年来又获得了经济鱼类的核质杂种如鲤鱼核和鲫鱼质、草鱼核和团头鱼质的杂种鱼，以及鱼类属间、亚科间、甚至不同目间的核质杂种。 一 动物细胞工程概述 染色体水平上进行的操作可分为两类： 一类是将一种生物的特定染色体按照人们的意图予以消除、添加或同别的生物的染色体置换或改造的技术。 另一类是设法增加或减少一个生物体内整套染色体组数的技术，例如多倍体。此研究在植物细胞方面有很多报导，在动物细胞方面，国内主要是在经济鱼类上。 一 动物细胞工程概述 在动物细胞方面，国内在经济鱼类的培育方面，也涉及这类技术的运用。至于外源基因导入细胞并在个体上表达出来的报导的例数虽不是很多，但引起的震动却是很大的。 例如1982年底宣布的“超级小鼠”，因为它标志着遗传育种的崭新方向，今后的发展是不可估量的。 一 动物细胞工程概述 1997年，英国Wilmut领导的小组用体细胞核克隆出了“多莉(Dolly)”绵羊，把动物细胞工程推上世纪辉煌的顶峰。 如果说在20世纪初Harrison刚刚栽种下动物细胞工程这株小苗的话，那么经过一个世纪的发展，这株小苗已经长成枝繁叶茂、硕果累累的大树。 一 动物细胞工程概述 为了适应工业化生产规模的需要，细胞工程还有一个重要方面，那就是哺乳动物的大量培养和无血清培养。 然而哺乳动物细胞的大量培养和细菌的大量培养完全不同，它们要脆弱和复杂得多。 这就给培养的条件设备提出了新课题：一个方向是扩大容积，如增加转瓶的数目，加大培养罐的容积，甚至到成百升； 另一个方向是向更自动化更模拟体内代谢环境的方向发展。 一 动物细胞工程概述 这样，每毫升中的细胞密度就可大大提高，每毫升中含的细胞分泌产物也可从微克水平提高到毫克水平。 但同时在大量培养中就会牵涉到另一个问题——血清的使用。目前在培养液中一般需加5%~15%的动物或人血清，不但来源有限、价格昂贵，各批之间的差异也很大。 因而无血消培养、进一步为无蛋白培养也成为开展细胞工程迫切需要解决的问题了。 一 动物细胞工程概述 从目前细胞工程进展的各个方面来看，动物细胞工程具有广阔的前景。值得提出的是：它建立在生物资源的可循环性上即节约能源，又利于保持自然条件。 目前细胞工程在开发上尚存在大量的基础研究和后续工业化规模的处理加工问题有待解决。 从事生物学的科研人员和工程技术人员的协同工作必能将细胞工程的发展推向新的高度，在今后的几十年内为人类作出巨大的贡赋。 第三节 动物细胞工程 一 动物细胞工程概述 二 动物细胞工程涉及的主要技术领域 三 动物细胞工程研究进展与应用 二 动物细胞工程涉及的主要技术领域 （一） 组织培养 （二）细胞融合 （三） 细胞拆合与核移植 （四）染色体转移 （五） DNA介导的基因转移 （六） 干细胞研究 实验室设施 1. 外环境的选择原则：空气条件良好、无水体污染 2. 装修要求：室内装修应选择发尘量少、不易粘附尘粒、气密性良好、吸湿性小的材料，墙壁