柽柳ThHSP1基因在酵母中的抗逆性分析.doc

  柽柳 ThHSP1 基因在酵母中的抗逆性分析# 迈迪娜· 吐尔逊，李妮，陈枭，赵欢，朱传华，高彩球** （东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室, 哈尔滨 150040） 摘要：热激蛋白(Heat shock proteins, HSPs)是生物体受热或其他环境胁迫后诱导表达的一类应 激蛋白。本研究用酵母表达系统研究了柽柳 HSP 基因(命名为 ThHSP1)的抗逆性。将 ThHSP1 基因构建到酵母表达载体 pYES2 中，转化到酿酒酵母 INVSc1 菌株中，并以转空 pYES2 质 粒的酵母 INVSc1(pYES2)作对照，比较两种酵母在干旱（Sorbitol）、重金属（CuSO4 和 ZnCl2）、 盐（NaCl、KCl、MgCl2、NaHCO3）、低温（-20）和高温（53）胁迫下的存活率，结 果表明，ThHSP1 基因提高了转基因酵母的抗各种胁迫的能力。 关键词：热激蛋白；柽柳；酵母表达；抗逆 中图分类号：Q78 Stress tolerance analysis of ThHSP1 gene from Tamarix hispida in yeast Mai Dina·Tuerxun, LI Ni, CHEN Xiao, ZHAO Huan, ZHU Chuanhua, GAO Caiqiu (State Key Laboratory of Forest Genetics and Tree Breeding, Northeast Forestry University, Harbin 150040) Abstract: Heat shock protein (Heat shock proteins, HSPs) are a kind of stress protein that induced by heat or other environmental stress in organism. In the present study, the recombinant yeast expression system was used study the stress tolerance of ThHSP from Tamarix hispida. The ThHSP1 was cloned into the pYES2 vector and transformed into yeast Saccharomyces cerevisiae INVSc1. And the yeast INVSc1 transformed with an empty pYES2 vector was employed as a control. The survival rates between the recombinant yeast INVSc1 (pYES2-ThHSP1) and control INVSc1 harboring empty pYES2 were compared under drought (Sorbitol),heavy metals(CuSO4 and ZnCl2）,Salts（NaCl、KCl、 MgCl2 and NaHCO3）,freezing（-20℃）and heat（53）stresses. These results demonstrated that ThHSP1 enhanced the tolerance to a variety of stress conditions in yeast. Key words: heat shock protein; tamarix hispida; yeast expression; stress tolerance 0 引言 热激蛋白(Heat shock proteins, HSPs)是生物体受热或其他环境胁迫后诱导表达的一类 应激蛋白。根据相对分子量的大小，热激蛋白可分为 HSP100 (ClpB)、HSP90、HSP70 (DnaK)、 HSP60 和小分子量 HSP (small heat shock protein，sHSP) 等几个家族[1] [2]。 HSP 在生物体 重参与多种功能活动，有“瑞士军刀”之称[3]。 目前已经从多种植物中克隆获得了 HSP 基因，如拟南芥[4] 、烟草[5]、水稻[6]、苜蓿[7]、 棉花[8]、玉米[9]等，并研究了部分 HSP 基因的抗逆功能，但这些植物大部分为草本植物， 对木本植物的 HSP 基因功能分析较少[10]。 刚毛柽柳是一种抗逆性非常强的木本盐生植物，是进行抗逆基因克隆和抗逆机理研究 的理想材料。本文从柽柳中克隆获得了 HSP 基因（命名为 ThHSP1），为了能快速分析