毒理学实验基础.pptVIP

2. 各种染毒途径：经呼吸道染毒 吸入染毒 气管内注入染毒 静式吸入染毒 动式吸入染毒 定义：在一定容积的密闭容器内，加入一定量的毒物使之挥发并与容器内空气充分混合，均匀分布，形成一定浓度的含毒空气环境，放入毒物，在规定的时间内观察动物的毒性反应。 静式吸入染毒 染毒装置：一般采用特制的机玻璃染毒柜或大的玻璃瓶。 注意事项： a.液态受试物不能滴漏到染毒柜底，以防粘上动物皮肤被动物舔食。 b.设计的最高染毒浓度不能超过该受试物的蒸气饱和浓度，以免受试物蒸发不全而达不到设计要求。 动式吸入染毒 定义：是采用机械通风装置，连续地将新鲜空气和毒物送入染毒柜，并排出等量的污染空气，使染毒浓度相对稳定。 染毒装置：由三部分组成 a.染毒柜 b.机械通风系统 c.配气系统 静态染毒柜 动态染毒柜 静式染毒与动式染毒的优缺点比较 静式吸入染毒 动式吸入染毒 优点 1. 设备简单，操作容易； 2. 消耗毒物少； 3. 用于急性毒性实验，毒物来源少也用于其它毒性试验。 １. 染毒柜内毒物浓度恒定 ２. 随时间延长，容器内O2和CO2浓度恒定； 3. 空气中温度和湿度恒定； ３. 适用于较长时间、反复染毒的实验。 缺点 随时间延长， 1. 容器内O2下降、CO2含量升高； 2. 毒物浓度下降； 3. 气温、气湿升高。 １. 设备装置复杂、昂贵； ２. 毒物消耗量大。 2. 各种染毒途径：经皮肤染毒 　１）备皮：机械脱毛、化学脱毛 脱毛区＜体表面积15% 　２）染毒方法 　　　　浸尾 　　　　涂皮 2. 各种染毒途径：经注射途径 腹腔注射； 肌肉注射； 静脉注射； 皮下注射； （三）生物材料的采集 1. 血液的采集 剪尾采血； 眼眶静脉丛采血； 眼球摘除采血； 断头采血； 心脏采血； 股动脉采血； 耳缘静脉采血； 腹主动脉采血； （三）生物材料的采集 2. 尿液和粪便的采集 代谢笼 第五节 毒理学实验质量控制 人事方面。 实验动物。 实验仪器和设备。 实验应有严格的标准化操作程序和要求。 受试物的完整资料。 实验记录。 实验室工作人员。 GLP：good laboratory practice 优良实验研究规范 SOP：standard operating procedure 标准操作方法 第六节 动物实验的职业道德 3R原则（Replace；Reduction；Refinement） 替代（Replace）：应用无知觉材料的科学方法来代替使用活的有知觉脊椎动物的方法； 减少（Reduction）：是指在能够保证获取一定数量与精确度的数量信息的前提下，减少动物的使用数量； 优化（Refinement）：在必须使用动物时，要尽量减少非人道程序的影响范围和程度。 实验动物 实验动物的选择 基本选择原则 种属选择 动物繁殖方式的选择 微生物标准选择 个体选择 健康动物的标准 染毒 标记的方式 常见染毒方式经口染毒 动式吸入染毒与静式吸入染毒 常用采血方法 如小鼠有津白I、津白Ⅱ、615，DBA／1和DBA／2，BALB/C，C3H，C57B／6J，A和A／He等。 远交群（outbred colony），封闭群（closed colony）： 为避免近亲交配造成的生殖能力低，体质差等近亲衰退现象，有意识的将一个品系的动物减少近亲交配所繁殖的动物称为该品系的远交群。 如果远交群中连续5年不引进外来动物，即为封闭群。 如昆明种小鼠、NIH小鼠、LACA小鼠、F344大鼠、Wistar大鼠、SD(Sprague-Dauley)大鼠等。 特点：远交群以及封闭群动物的遗传均一性比近交系差，但封闭群比远交群好。 根据实验动物遗传的均一性排序：近交系最高、杂交群次之、封闭群较低。 但一般认为还没能证明某一品系对所有的遗传毒性物质比其他品系都敏感。 （四）微生物学等级标准选择 目前国际上通过微生物学监察手段，按对动物控制的净化程度，把实验动物分为四类，即： Ⅰ级：普通动物（conventional animal , CV） Ⅱ级：清洁动物（clean animal , CL） Ⅲ级：无特定病原体动物（specific pathogen-free, SPF） Ⅳ级：无菌动物（germ free animal, GF） 实验动物设施的分类 开放系统（open system): 饲育环境与外界相同，有强力通风设施，饲料、饮水和垫料要求不被污染，应有防鼠和防昆虫设施。 2. 屏蔽系统（barrier system):